植物乳杆菌诱导绵羊瘤胃上皮细胞SBD-1表达的信号通路途径初探

• 作者: 刘骄 张曼 杨银凤 田巧珍 范燕茹 金鑫
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: β-防御素-1 瘤胃上皮细胞 乳酸杆菌 Toll样受体2 实时荧光定量PCR
• 年，卷（期）: 2016,（5）
• 所属期刊栏目: 基础兽医
• 页码范围: 1026-1032
• 页数: 7页
• 分类号: S826|S852
• 字数: 4229字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11843/j.issn.0366-6964.2016.05.021

摘要

本试验旨在探索乳酸杆菌诱导绵羊瘤胃上皮细胞SBD-1表达的可能途径.采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)的方法,对已建立的诱导SBD-1表达模型中Toll样受体2(Toll like receptor 2,TLR2)及其相关因子的基因表达变化进行检测;然后选用3种信号通路抑制剂,即NF-κB信号通路抑制剂PDTC、ERK 1/2信号通路抑制剂PD98059和JNK信号通路抑制剂SP600125,将细胞分为8组:细胞组:不作处理;阳性对照组:只添加植物乳杆菌P-8(L.plantarum P-8)诱导;PDTC组:只添加PDTC预处理细胞(PDTC);PDTC+L.plantarum P-8组:PDTC +L.plantarum P-8诱导;PD98059组:PD98059;SP600125组:SP600125;PD98059+L.plantarum P-8组:PD98059+L.plantarum P-8;SP600125+L.plantarum P-8组:SP600125+L.plantarum P-8.采用RT-qPCR 的方法检测各组SBD-1 mRNA表达水平.结果表明,绵羊瘤胃上皮细胞被L.plantarum P-8诱导后,TLR2及其转接蛋白MyD88、NF-κB和ERK1/2、JNK各基因的mRNA水平都较空白组细胞内的表达极显著增加(P＜0.01);添加抑制剂后再诱导,发现抑制剂PD98059和SP600125均能极显著(P＜0.01)抑制细胞内SBD-1 mRNA的表达,而PDTC仅能显著抑制(P＜0.05)SBD-1的表达.结果表明,L.plantarum P-8可促进绵羊瘤胃上皮细胞TLR2、MyD88、NF-κB、JNK和ERK 1/2基因的mRNA表达;添加NF-κB信号通路抑制剂PDTC、ERK 1/2信号通路抑制剂PD98059和JNK信号通路抑制剂SP600125,可抑制L.pla,ntarum P-8对SBD-1 mRNA的诱导作用.综上表明,L.plantarum P-8有可能通过激活绵羊瘤胃上皮细胞内NF-κB、JNK、ERK1/2等信号通路促进SBD-1的表达.