高效液相色谱法测定重组艾塞那肽纯度的方法验证研究

• 作者: 史长军 吴宏斌 方朝东 李健峰 王永智 饶玲
• 来源期刊: 药物生物技术
• 学科: 化学
• 关键词: 高效液相色谱 艾塞那肽 纯度 方法验证 重组表达 糖尿病
• 年，卷（期）: 2016,（4）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 341-344
• 页数: 4页
• 分类号: O657.7+2
• 语种: 中文

摘要

艾塞那肽应用于2型糖尿病的临床治疗,实验室通过大肠杆菌重组表达方式,获得重组艾塞那肽.为快速便捷地检验样品表达纯化效果,使用高效液相法测定重组艾塞那肽纯度,并对该法进行方法学验证研究.经过多次实验摸索,确定色谱条件:采用色谱柱Agilent ZORBAX Eclipse Cs(4.6 mm×250 mm,粒径5μm);以0.1％三氟乙酸水溶液为流动相A,0.1％三氟乙酸乙腈溶液为流动相B,0～ 60 min下,A相80％～50％,B相20％ ～ 50％,进行梯度洗脱;流速为0.8 mL/min;检测波长为214 nm;柱温为40℃;进样量为50 μL.结果显示该方法下专属性研究满足要求,样品在12 h内较稳定,重现性研究CV值为0.5％,艾塞那肽在0.125 ～2.0 mg/mL范围内线性良好(r=0.999 5),最低检测限为0.25 mg/mL,在改变柱温、流速、流动相比例等细微色谱条件时,RSD值均≤2.0％,耐用性研究合格.经过验证研究,本方法准确、可靠、专属性强,可用于重组艾塞那肽的纯度测定,为产品的研发纯化提供快速评价指标.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王永智		6	4	1.0	2.0
2	吴宏斌		3	4	1.0	2.0
3	方朝东		3	4	1.0	2.0
4	饶玲		2	4	1.0	2.0
5	史长军		1	0	0.0	0.0
6	李健峰		1	0	0.0	0.0