组织工程角膜内皮的体外构建及在猕猴角膜移植中的应用

• 作者: 樊廷俊 赵君
• 来源期刊: 中华眼视光学与视觉科学杂志
• 关键词: 组织工程 内皮,角膜 角膜移植 猕猴属 体外构建
• 年，卷（期）: 2016,（4）
• 所属期刊栏目: 组织工程角膜和人工角膜
• 页码范围: 226-231
• 页数: 6页
• 字数: 5381字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1674-845X.2016.04.007

摘要

目的 体外构建出形态结构功能正常的组织工程人角膜内皮(TE-HCE),并以猕猴动物模型验证其维持角膜透明的作用.方法 实验研究.以非转染人角膜内皮单克隆细胞株细胞(mcHCE细胞)为种子细胞,以去上皮层修饰羊膜(mdAM)为载体支架体外构建出TE-HCE,对其透明度、形态、细胞密度、组织学结构、超微结构、功能蛋白的荧光表达进行检测;采用穿透性角膜移植手术(PKP)对猕猴右眼分别移植TE-HCE(3眼,TE-HCE组)和mdAM(3眼,mdAM组),未移植的左眼作为正常对照眼(6眼,对照组),利用裂隙灯显微镜、角膜内皮镜、角膜测厚仪和眼压计对术后动物的角膜透明度、角膜内皮细胞密度(ECD)、中央角膜厚度(CCT)和眼压(IOP)进行在体检测,并利用荧光显微镜检测移植眼角膜内皮细胞的CM-DiI标记.数据处理均采用单因素方差分析.结果 体外构建的TE-HCE透明度高,具有与活体角膜内皮近似的形态结构,单层细胞密度高达(3 602±45)个/mm2,细胞连接蛋白和膜运输蛋白呈阳性表达;术后跟踪观测结果显示,TE-HCE移植眼的角膜没有出现明显的炎症和免疫排斥反应,角膜维持透明,虽然出现了轻度角膜水肿,但随着时间的推移CCT逐渐下降,术后181 d时单层细胞密度为(2 796±157)个/mm2;而mdAM移植眼的角膜则出现了明显的炎症反应,长人了新生血管,角膜持续混浊与水肿,厚度没有明显的下降趋势;各组间lOP的变化无明显差异.CM-DiI荧光检测结果显示TE-HCE移植眼的角膜内皮移植区的细胞均带有CM-DiI标记(来自于移植的TE-HCE).结论 体外构建的高密度TE-HCE具有正常的形态结构,且功能蛋白表达正常,移植后能使猕猴角膜逐渐恢复透明度和厚度,表明TE-HCE在体内可重建出功能正常的角膜内皮,有望用于角膜内皮异常疾病的临床治疗.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	樊廷俊	中国海洋大学海洋生命学院角膜组织工程实验室	55	543	13.0	21.0
2	赵君	中国海洋大学海洋生命学院角膜组织工程实验室	11	77	6.0	8.0