家蚕类钙粘蛋白BtR-175基因敲除突变体创制和抗性检测

• 作者: 付剑锋 夏庆友 林平 程廷才 蒋亮 马三垣
• 来源期刊: 蚕业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 类钙粘蛋白 基因编辑 黑胸败血芽孢杆菌 抗性 家蚕
• 年，卷（期）: 2016,（5）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 814-819
• 页数: 6页
• 分类号: S882
• 语种: 中文
• DOI: 10.13441/j.cnki.cykx.2016.05.009

摘要

家蚕类钙粘蛋白BtR-175不仅是苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)晶体毒素蛋白的受体蛋白,也是黑胸败血芽孢杆菌(Bacillus bombysepticus)晶体毒素蛋白的受体分子.为建立对黑胸败血芽孢杆菌具有抵抗能力的家蚕品系,采用CRISPR/Cas9介导的基因组编辑技术,设计引导RNA (gRNA)对家蚕BtR-175基因进行精确定点编辑,对蚕卵显微注射重组质粒pUC57-hA4-Cas9和T-U6-BtR-175后,筛选获得2个碱基插入导致蛋白质翻译提前终止的BtR-175基因敲除突变体,命名为△BtR-175.4龄起蚕经口添食黑胸败血芽孢杆菌,结果△BtR-175突变体家蚕的死亡率为34.4％±5.8％,野生型家蚕的死亡率为57.8％±8.4％,表明△BtR-175对黑胸败血芽孢杆菌的侵染抵抗性显著提高.饲养试验显示△BtR-175突变体和野生型家蚕的茧层量没有显著性差异.该突变体有望进一步培育为家蚕抗性育种素材.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	程廷才		8	53	3.0	7.0
2	夏庆友		103	602	14.0	20.0
3	马三垣		7	42	2.0	6.0
4	蒋亮		3	13	1.0	3.0
5	林平		6	5	2.0	2.0
6	付剑锋		2	2	1.0	1.0