蔬菜中黄瓜花叶病毒的RT-LAMP快速检测

• 作者: 孙现超 张旺 李斌 赵雪君 邓永杰 陈德鑫 青玲 魏周玲 黄国联
• 来源期刊: 园艺学报
• 学科: 农学
• 关键词: 黄瓜花叶病毒 蔬菜 外壳蛋白基因 反转录环介导等温扩增技术 检测
• 年，卷（期）: 2016,（6）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 1203-1210
• 分类号: S63
• 语种: 中文
• DOI: 10.16420/j.issn.0513-353x.2016-0006

摘要

为了建立黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)可视化的反转录环介导等温扩增(Reverse transcription loop-mediated isothermal amplification,RT-LAMP)检测体系,根据CMV的外壳蛋白(coat protein,CP)基因核苷酸序列设计4条引物,优化了RT-LAMP反应体系中的dNTPs和Mg2+浓度、反应温度和反应时间,同时对体系进行了特异性和灵敏性的测定.最终确定RT-LAMP的最优反应体系为dNTPs 1.2 mmol· L-1,Mg2+6 mmol·L-1,在61℃的条件下反应40 min.该RT-LAMP体系比RT-PCR反应体系的灵敏度高100倍,并且反应产物可以通过将反应管快速离心后观察底部沉淀或通过加入SYBRGreen Ⅰ后的显色反应进行结果判定.该RT-LAMP检测体系可以对多种蔬菜的CMV进行高效快速的检测,操作简便,花费较小,十分适合生产上检测CMV使用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孙现超	西南大学植物保护学院	55	220	9.0	11.0
2	青玲	西南大学植物保护学院	47	293	9.0	12.0
3	陈德鑫	中国农业科学院烟草研究所	57	482	10.0	19.0
4	李斌		56	451	13.0	17.0
5	黄国联		11	36	3.0	5.0
6	张旺	西南大学植物保护学院	3	10	1.0	3.0
7	魏周玲	西南大学植物保护学院	3	17	3.0	3.0
8	赵雪君	西南大学植物保护学院	2	10	1.0	2.0
9	邓永杰	西南大学植物保护学院	1	9	1.0	1.0