ANTP-SmacN7融合肽对H460细胞的辐射增敏作用

• 作者: 刘宝娜 刘强 孙晓辉 宋志仪 徐畅 杜利清 王彦 王津晗 王芹
• 来源期刊: 中国肺癌杂志
• 关键词: Smac蛋白 肿瘤细胞 细胞凋亡 辐射敏感性
• 年，卷（期）: 2016,（5）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 241-246
• 页数: 6页
• 字数: 4114字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3779/j.issn.1009-3419.2016.05.01

摘要

背景与目的肿瘤的辐射耐受制约了放疗疗效，第二个线粒体衍生的半胱氨酸蛋白酶激活剂（Second mitochondria-derived activator of caspase, Smac）蛋白类似物可明显提高辐射诱导的肿瘤细胞凋亡，有望成为新型肿瘤辐射增敏药物。本研究旨在探讨新型Smac蛋白类似物ANTP-SmacN7融合肽对肺癌细胞系H460的辐射增敏作用。方法合成ANTP-SmacN7融合肽，连接荧光素FITC以观察融合肽能否进入细胞。对数生长期H460细胞分为空白对照组、单纯照射组、ANTP-SmacN7组和照射联合ANTP-SmacN7组，单纯照射组给予0 Gy、2 Gy、4 Gy、6 Gy照射，照射联合ANTP-SmacN7组中ANTP-SmacN7的浓度为20μmol/L，WST-1测定H460细胞的增殖。流式细胞仪测定细胞处理后24 h和48 h的细胞凋亡率。Western blot实验检测caspase3和cleaved caspase3的表达水平。结果 ANTP-SmacN7融合能够顺利进入细胞，且能够增强H460细胞的辐射敏感性（F=25.1，P<0.01，增敏比为1.86），照射联合ANTP-SmacN7可明显降低H460细胞的克隆形成率（χ2=45.2,P<0.01；χ2=40.3,P<0.01），提高cleaved caspase3的表达量，促进caspase3的活化，增加辐射诱导的细胞凋亡率。结论 ANTP-SmacN7融合肽可明显提高H460细胞的辐射敏感性，作为一种新的Smac蛋白类似物有望用于肿瘤的辐射增敏治疗。