重组鸡白细胞介素-7在HEK293T细胞中的表达及其条件分析

• 作者: 仲飞 崔丹 张建楼 张永红 徐建 李秀锦 王利月 霍珊珊
• 来源期刊: 河北农业大学学报
• 关键词: ChIL-7 最适表达条件 正交试验 HEK293T细胞
• 年，卷（期）: 2016,（4）
• 页码范围: 83-87
• 页数: 5页
• 分类号: S831
• 语种: 中文
• DOI: 10.13320/j.cnki.jauh.2016.0089

摘要

为提高重组鸡白细胞介素-7(chIL-7)在真核细胞中的表达水平,本试验分析了影响基因表达的一些因素,包括转染方法、质粒用量、转染时间及表达时间等,对重组chIL-7表达水平的影响,并通过正交试验设计方法确定了利用HEK293T细胞表达重组chIL-7的最适表达条件.结果表明,在T75细胞瓶中,由脂质体介导使用30 μg质粒,转染4h,表达48 h和由磷酸钙介导使用40μg质粒,转染6h,表达60 h可以获得较高的表达效率,表达水平分别为(124±9)和(94.3±8)μg/106个细胞.本结果为进一步研究chIL-7的功能提供有利条件.