牛源犬新孢子虫酵母双杂交cDNA文库的构建及鉴定

• 作者: 张守发 李男礼 李积旭 海旭南 贾立军
• 来源期刊: 畜牧与兽医
• 学科: 农学
• 关键词: 犬新孢子虫 酵母双杂交 cDNA文库
• 年，卷（期）: 2016,（1）
• 所属期刊栏目: 兽医科技
• 页码范围: 75-77
• 页数: 3页
• 分类号: S852.7
• 字数: 1652字
• 语种: 中文

摘要

旨在构建酵母双杂交牛源犬新孢子虫cDNA表达文库,进而为研究新孢子虫功能结构以及为其入侵宿主致病机理研究提供良好的试验体系.体外培养牛源犬新孢子虫延边株,纯化并提取虫体总RNA,应用SMART技术合成双链cDNA (ds cDNA).利用CHROMA SPINT+TE-400Columns纯化柱纯化dscDNA,并与线性化的pGADT7-Rec共转化酵母菌菌株Y187,以同源重组的方式在酵母细胞内构建牛源犬新孢子虫酵母双杂交cDNA表达文库.结果显示,文库容量为5.78×108 cfu/mL,随机挑取23个单克隆进行菌落PCR检测,插入的双链cDNA片段大小为400～4 000 bp,平均长度在2000 bp左右,文库重组率为100％,此文库可用于酵母双杂交筛选.试验为筛选新孢子虫与宿主之间相互作用蛋白研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	贾立军	延边大学农学院	111	293	9.0	10.0
2	张守发	延边大学农学院	147	901	14.0	24.0
3	李积旭	延边大学农学院	12	25	3.0	3.0
4	李男礼	延边大学农学院	9	21	3.0	4.0
5	海旭南	延边大学农学院	4	9	2.0	3.0