摘要:
[目的]研究意大利蜜蜂(Apis mellifera ligustica)蜂王与工蜂幼虫甲基供体S-腺苷甲硫氨酸(S-adenosylmethionine,SAM)合成与代谢的差异,为探索DNA甲基化与蜜蜂级型分化的关系提供理论依据.[方法]试验选用890只1日龄雌性蜂幼虫,分别来自5群姐妹蜂王群.其中445只进行人工育王(89只/群);剩余445只培育成工蜂(89只/群).取3、4、5日龄蜂王和工蜂幼虫,测定其体内SAM合成与代谢关键酶基因表达和酶活性的差异.[结果]蜂王幼虫SAM含量随日龄的增加变化不显著(P>0.05);工蜂幼虫SAM含量随日龄增加呈上升趋势(P<0.05).蜂王幼虫SAMS基因表达量随日龄增加呈梯度下降的趋势(P<0.01),而工蜂幼虫SAMS表达随日龄变化不显著(P>0.05);3日龄与4日龄时,蜂王幼虫SAMS表达量显著高于工蜂(P<0.05),5日龄时,工蜂幼虫SAMS表达量显著高于蜂王(P<0.05).Dnmt1a与Dnmt3表达在两级型间差异不显著(P>0.05),其中蜂王幼虫Dnmt1a表达随日龄增加无显著变化(P>0.05),但其酶活性呈下降趋势(P<0.05);工蜂幼虫Dnmt1a表达随日龄增加呈下降趋势(P>0.05),其酶活性呈上升趋势(P<0.01),其中3日龄与4日龄时,蜂王幼虫Dnmt1酶活性显著高于工蜂幼虫(P<0.05),而5日龄时,工蜂幼虫Dnmt1酶活性显著高于蜂王幼虫(P<0.05).蜂王Dnmt3表达量随日龄增加呈下降趋势(P< 0.05),工蜂幼虫Dnmt3表达随日龄增加变化不显著(P>0.05);蜂王幼虫Dnmt 3酶活性随日龄变化不显著(P>0.05),工蜂幼虫Dnmt 3酶活性随日龄变化显著(P<0.05),但蜂王幼虫Dnmt 3酶活性在3、4、5日龄均显著高于工蜂幼虫(P<0.01).[结论]3-5日龄意大利蜜蜂蜂王幼虫与工蜂幼虫体内活性甲基供体SAM的合成与代谢存在差异.在4日龄之前,蜂王幼虫SAM的合成比工蜂活跃,4日龄之后,工蜂幼虫的SAM合成与蜂王幼虫相近;在4日龄之前,SAM参与DNA维持甲基化的代谢过程,蜂王幼虫比工蜂活跃,4日龄之后,工蜂幼虫比蜂王幼虫活跃;在3-5日龄,SAM参与DNA从头甲基化的代谢活性,蜂王幼虫始终不低于工蜂幼虫.