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摘要:
为丰富海水鱼类细胞系的数量,提供更多的基因功能研究及病毒分离、鉴定工具,本研究建立了一种新的细胞系,大菱鲆心脏细胞系(Scophthalmus maximus heart cell line,SMH).该细胞系使用组织块法(tissue block method)启动原代培养,培养液是添加了胎牛血清(fetal bovine serum,FBS)、人类碱性成纤维生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)、抗生素、β-巯基乙醇(2-mercaptoethanol,2-ME)、hepes(4-(2-hydroxyethyl)-1-piperazineethanesulfonic acid)的DMEM/F 12.结果显示,SMH形态呈典型的成纤维细胞样,在培养液中生长分裂旺盛,经230 d传代培养,成功传至58代.用带有绿色荧光蛋白(green fluores-cent protein,GFP)的pEGFP-N3质粒转染SMH,发现GFP在细胞中成功表达,转染效率为40%左右.使用遗传霉素(geneticin,G418)对重组质粒细胞进行筛选,得到了一簇荧光表达效率高的细胞.染色体分析表明,具有正常二倍体核型(2n=44)的细胞占64%.线粒体细胞色素C氧化酶Ⅰ(cytochrome oxidase sub-unit Ⅰ,CO Ⅰ)基因鉴定出该细胞系来源于大菱鲆.该细胞系的建立为大菱鲆功能基因及其他基于细胞系的研究奠定了基础,对大菱鲆的病毒感染途径和分子机制研究具有重要的理论意义.
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内容分析
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文献信息
篇名 大菱鲆心脏细胞系的建立与鉴定
来源期刊 农业生物技术学报 学科 生物学
关键词 大菱鲆 大菱鲆心脏细胞系(SMH) GFP转染 线粒体细胞色素C氧化酶Ⅰ(CO Ⅰ)基因
年,卷(期) 2016,(7) 所属期刊栏目 研究资源与技术改进
研究方向 页码范围 1092-1100
页数 分类号 Q2-33
字数 语种 中文
DOI 10.3969/j.issn.1674-7968.2016.07.017
五维指标
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研究主题发展历程
节点文献
大菱鲆
大菱鲆心脏细胞系(SMH)
GFP转染
线粒体细胞色素C氧化酶Ⅰ(CO Ⅰ)基因
研究起点
研究来源
研究分支
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引文网络交叉学科
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期刊影响力
农业生物技术学报
月刊
1674-7968
11-3342/S
大16开
北京海淀区圆明园西路2号中国农业大学生命科学楼1053室
2-367
1993
chi
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