大鼠角膜缘干细胞分离培养及其横向分化能力初探

• 作者: 严会文 廖文萍 胡蓉 苏敏 陈剑英 高杰
• 来源期刊: 局解手术学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 大鼠角膜缘干细胞 神经干细胞样细胞 表皮生长因子 碱性成纤维细胞生长因子 全反式维甲酸
• 年，卷（期）: 2016,（4）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 248-250,251
• 页数: 4页
• 分类号: R329.2
• 字数: 3208字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11659/jjssx.12E015112

摘要

目的：体外分离培养大鼠角膜缘干细胞（ LSCs），并探讨在细胞因子EGF、bFGF联合RA作用下，LSCs体外横向分化为神经干细胞样细胞的能力。方法体外分离培养LSCs并进行p63免疫组化鉴定。在原代培养的LSCs中，设立2个诱导组进行分化实验，诱导组1加入EGF（20 ng／mL）和bFGF（10 ng／mL），诱导组2加入EGF（20 ng／mL）、bFGF（10 ng／mL）和RA（25 ng／mL），同时设立空白对照组。培养7 d后，收集各组细胞作神经元标志物Nestin的免疫组化检测及阳性细胞计数，收集各组细胞蛋白做蛋白免疫印迹分析各组Nestin蛋白表达情况，相关数据作统计学分析。结果免疫组化结果显示，体外分离培养的LSCs p63呈阳性，诱导分化的2组细胞Nestin呈阳性表达，阳性率分别为（77．01±6．32）％和（84．01±5．43）％，诱导组2的诱导率高于诱导组1，差异具有统计学意义（P＜0．05）；对照组细胞Nestin呈阴性表达。蛋白免疫印迹结果显示，2个诱导组在240 kDa处可见Nestin蛋白条带，诱导组2 Nestin蛋白表达略高于诱导组1，对照组未见Nestin蛋白条带。结论成功分离培养大鼠LSCs，在细胞因子EGF、bFGF作用下，LSCs具有横向分化为神经干细胞样细胞的能力，同时联合使用RA有促进LSCs向神经干细胞样细胞分化的作用。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	胡蓉	贵州医科大学组织学与胚胎学教研室	17	21	3.0	3.0
2	高杰	贵州医科大学组织学与胚胎学教研室	13	13	3.0	3.0
3	苏敏	贵州医科大学组织学与胚胎学教研室	12	17	3.0	3.0
4	廖文萍	贵州医科大学组织学与胚胎学教研室	3	3	1.0	1.0
5	严会文	贵州医科大学组织学与胚胎学教研室	3	7	2.0	2.0
6	陈剑英	贵州医科大学组织学与胚胎学教研室	1	2	1.0	1.0