E-cadherin对奶山羊雄性生殖干细胞自我更新与增殖的影响

• 作者: 华进联 翟源心 郑丽明
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 生物学
• 关键词: E-cadherin 雄性生殖干细胞(mGSCs) 自我更新 增殖 奶山羊
• 年，卷（期）: 2016,（9）
• 所属期刊栏目: 专题:动物干细胞与胚胎工程
• 页码范围: 1439-1449
• 分类号: Q71
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2016.09.018

摘要

E-钙粘素(E-cadherin)是干细胞微环境的重要组成部分,其蛋白结构在各物种间具有较高的保守性,影响精原干细胞的自我更新、增殖和分化等多个环节,对精原干细胞具有复杂的调控作用.为探索Ecadherin对奶山羊(Capra hircus)雄性生殖干细胞(male germline stem cells,mGSCs)自我更新与增殖的影响,本研究将E-cadherin真核超表达载体pE-cadherin-GFP转染奶山羊mGSCs,检测钙粘素1基因(cadherin 1,CDH1)超表达的作用.结合qRT-PCR、Western blot和免疫荧光染色等方法检测E-cadherin及与细胞增殖、多能性相关的标记基因的变化.结果表明,E-cadherin超表达组的奶山羊mGSCs相对于对照组细胞E-cadherin的表达量明显上调,与细胞自我更新和增殖相关的基因整合素α6(integrin alpha-6,CD49f)、神经胶质细胞源性的神经营养因子家族受体α1(glial cell line-derived neurotrophic factor family receptor alpha-1,GFRα1)、早幼粒细胞白血病锌指基因(promyeloeytie leukaemia zinc-finger,PLZF)、八聚体结合转录因子(octamer-binding transcription factor 4,OCT4)和增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)表达明显上调.另外,本研究通过免疫组化技术对成年奶山羊睾丸组织进行E-cadherin表达检测,发现E-cadherin阳性细胞明显较多位于曲细精管基底膜的精原干细胞存在部位.初步说明E-cadherin可能会促进奶山羊mGSCs的增殖及多能性的维持.本研究为奶山羊mGSCs增殖分化等研究提供分子基础,有助于建立稳定的雄性生殖干细胞株.