丹参酚酸B和山楂黄酮合用对游离脂肪酸诱导的大鼠肝细胞脂质沉积和凋亡的作用

• 作者: 叶军 张洁 薛冬英 袭渤人
• 来源期刊: 肝脏
• 关键词: 肝细胞 丹参酚酸 B 山楂黄酮 游离脂肪酸 肝细胞凋亡 c-jun 氨基末端激酶
• 年，卷（期）: 2016,（3）
• 所属期刊栏目: 论 著
• 页码范围: 183-190
• 页数: 8页
• 字数: 6093字
• 语种: 中文

摘要

目的：研究丹参酚酸 B 和山楂黄酮对游离脂肪酸诱导大鼠肝细胞脂质沉积和凋亡的作用及其机制。方法采用肝脏原位胶原酶灌注法分离大鼠原代肝细胞，油酸：棕榈酸＝2：1造模。原代肝细胞和 HepG2均分为正常对照组、模型组、模型＋丹参酚酸 B 组、模型＋山楂黄酮组、模型＋丹参酚酸 B＋山楂黄酮组、模型＋SP600125组、丹参酚酸 B 组、山楂黄酮组、丹参酚酸 B＋山楂黄酮组、SP600125组、DMSO 对照组。游离脂肪酸刺激原代肝细胞的浓度为250μmol／L、刺激 HepG2的浓度为500μmol／L；丹参酚酸 B 的浓度为1μmol／L；山楂黄酮的浓度为5μg／mL；SP600125的浓度为10μmol／L。观察①油红 O 染色：丹参酚酸 B 和山楂黄酮对游离脂肪酸刺激的肝细胞内脂滴变化的影响；②ELISA 法：丹参酚酸 B 和山楂黄酮对游离脂肪酸诱导的肝细胞凋亡的影响；③高内涵筛选 Hoechst33258染色：丹参酚酸 B 和山楂黄酮对游离脂肪酸诱导的肝细胞凋亡的影响；④Western blot：丹参酚酸 B 和山楂黄酮对游离脂肪酸刺激的肝细胞内 p-JNK 表达的影响。结果①油红 O 染色显示：与正常对照组比较，游离脂肪酸作用于原代肝细胞、HepG2细胞24 h 后，细胞内脂滴含量显著增加（P 均＜0．01）。丹参酚酸和山楂黄酮可显著减少游离脂肪酸诱导的原代肝细胞、HepG2细胞内脂滴的含量（P ＜0．01，P ＜0．05）。② ELISA 检测结果：与正常对照组相比游离脂肪酸组原代肝细胞及 HepG2细胞吸光值[Absorbance（A405 nm-A490nm）]显著增高，细胞凋亡明显（P 均＜0．01）；丹参酚酸 B 和山楂黄酮显著抑制游离脂肪酸诱导的原代肝细胞、HepG2细胞凋亡（P 均＜0．01）。③高内涵筛选 Hoechst33258染色：与正常对照组比较，游离脂肪酸组细胞核平均荧光强度值及凋亡率明显增高（P 均＜0．01）。丹参酚酸 B 和山楂黄酮显著降低游离脂肪酸刺激的原代肝细胞细胞核平均荧光强度值及凋亡率（P 均＜0．01）。HepG2细胞检测结果与原代肝细胞趋势一致。④Western blot 结果：与正常对照组比较，游离脂肪酸刺激原代肝细胞24 h 时可显著促进 p-JNK 的表达（P 均＜0．01）。丹参酚酸 B 和山楂黄酮对游离脂肪酸刺激原代肝细胞24 h 时 p-JNK 的表达有显著抑制作用（P 均＜0．01）。HepG2细胞 p-JNK 结果与原代肝细胞趋势一致。结论①丹参酚酸 B 和山楂黄酮合用能够抑制游离脂肪酸诱导的肝细胞内脂滴增加及肝细胞凋亡。②丹参酚酸 B 和山楂黄酮合用能够抑制游离脂肪酸诱导的肝细胞内 JNK 的活化。二者是丹参酚酸 B 和山楂黄酮合用防治非酒精性脂肪性肝炎的重要机制。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	薛冬英	上海中医药大学附属普陀医院感染科	30	302	10.0	16.0
2	叶军	上海中医药大学附属普陀医院感染科	27	193	9.0	12.0
3	张洁	上海中医药大学附属普陀医院感染科	50	178	7.0	12.0
4	袭渤人	上海中医药大学附属普陀医院感染科	1	6	1.0	1.0