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摘要:
植物类型Ⅲ聚酮合酶超家族(PKSs),又称查尔酮合酶(Chalcone synthase,CHS)超家族,催化合成多种植物次生代谢产物的分子骨架.苯亚甲基丙酮合酶(Benzalacetone synthase,BAS)催化4-香豆酰辅酶A与丙二酰辅酶A通过一步脱羧缩合反应生成苯亚甲基丙酮,是一系列具有重要生物学活性苯丁烷类化合物及其衍生物的前体化合物.前期工作从虎杖中分离出苯亚甲基丙酮合酶BAS (PcPKS2)和1个具有CHS和BAS活性的双功能酶(PcPKS1).两者与超家族其他成员序列经比较,在包括门卫氨基酸Phe215和Phe265在内的重要氨基酸序列存在一定差异.已有蛋白晶体学研究结果表明,PKSs家族不同成员的功能多样性来自于酶催化位点的非常微小的构象变化.为了能够从结构上比较PcPKS2和PcPKS1双功能酶活性差异可能产生的机制,以确定其高效BAS活性的分子机理,研究利用了大肠杆菌原核表达系统过量表达了C-端融合有His6标签的重组蛋白,经纯化得到了高纯度蛋白.经过对其晶体生长条件进行摸索和优化,得到了能用于X-射线衍射的单晶,为其结构解析、催化机理研究、了解虎杖聚酮类化合物生物合成机制和该类酶在基因工程中的应用提供了基础.
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文献信息
篇名 虎杖苯亚甲基丙酮合酶PcPKS2的表达纯化和晶体生长
来源期刊 生物工程学报 学科
关键词 虎杖 苯亚甲基丙酮合酶 晶体生长
年,卷(期) 2016,(2) 所属期刊栏目 生物技术与方法
研究方向 页码范围 250-258
页数 分类号
字数 语种 中文
DOI 10.13345/j.cjb.150234
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 马文瑞 北京农学院植物科学技术学院 1 0 0.0 0.0
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生物工程学报
月刊
1000-3061
11-1998/Q
大16开
北京朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所B401
82-13
1985
chi
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4562
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