尖孢镰刀菌分子检测技术的建立与应用

• 作者: 伍文宪 刘勇 刘红雨 周西全 张蕾 黄小琴
• 来源期刊: 草业学报
• 关键词: 根腐病 尖孢镰刀菌 基因间隔区 分子检测
• 年，卷（期）: 2016,（5）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 109-115
• 页数: 7页
• 字数: 4410字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11686/cyxb2015335

摘要

尖孢镰刀菌从形态学和分子生物学上与属内多种菌难于区分，为准确鉴定豆科牧草上的尖孢镰刀菌，本研究基于尖孢镰刀菌与其他镰刀菌的核糖体 DNA 基因间间隔区 IGS（intergenic spacer）序列间的差异，设计了一对特异性引物 P1／P2，检测体系可以特异地从尖孢镰刀菌中扩增出一条1081 bp 的条带；引物 P1／P2对尖孢镰刀菌基因组 DNA 的检测阈值为100 pg，对土壤中尖孢镰刀菌分生孢子的检测灵敏度为100个孢子／g 土；同时，引物 P1／P2也可以对发病牧草根部组织中尖孢镰刀菌的存在进行特异性检测。检测体系可不经过室内病原菌的分离纯化即可有效的从土壤和病株中提取的 DNA 进行 PCR 检测鉴定，是一种快速有效的豆科牧草根腐病病原菌分子检测技术。