Caspases抑制条件下5-FU诱导乳腺癌细胞发生坏死性凋亡的作用

• 作者: 任凯 刘浩 周灿 孙小锦 崇殿龙 张智瑞
• 来源期刊: 山西医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 乳腺癌 5-氟尿嘧啶 z-VAD-fmk 凋亡 caspases 坏死性凋亡
• 年，卷（期）: 2016,（9）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 808-812
• 页数: 5页
• 分类号: R737.9
• 字数: 3799字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13753/j.issn.1007-6611.2016.09.006

摘要

目的 探讨5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)对乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖的抑制作用,并在抑制caspases的条件下,对5-FU诱导的乳腺癌细胞的死亡形式进行探讨. 方法 MTT法检测不同浓度的5-FU(0,4,8,16,24,32 μmol/L)对乳腺癌细胞增殖的抑制作用,筛选适宜的药物浓度.在适宜药物浓度下实验分为对照组、z-VAD-fmk组、5-FU组、5-FU+z-VAD-fmk组,MTT法检测乳腺癌细胞存活率;PI单染流式细胞术检测乳腺癌细胞的死亡率;DAPI染色检测乳腺癌细胞核的变化;透射电镜观察乳腺癌细胞的死亡形式;Western blot检测坏死性凋亡蛋白RIP1表达的变化. 结果 8μmol/L为5-FU的适宜浓度,该浓度下MDA-MB-231细胞在24 h,48 h,72 h的存活率分别为(68.94 ±1.17)％,(48.76±1.47)％和(44.15±2.41)％.MTT、PI、DAPI实验结果表明与对照组和5-FU组相比,5-FU+ z-VAD-fmk组细胞存活率明显降低(P＜0.05),细胞核浓染加深,核固缩现象显著.电镜结果显示5-FU组细胞发生凋亡,5-FU+ z-VAD-fmk组细胞发生坏死性凋亡.Western blot结果表明:z-VAD-fmk联用时5-FU明显上调RIP1蛋白的表达. 结论 5-FU可以诱导MDA-MB-231细胞发生凋亡;caspases抑制条件下5-FU通过激活RIP1诱导MDA-MB-231细胞发生坏死性凋亡.