间接ELISA法在注射用矛头蝮蛇血凝酶蛇毒种属鉴别中的应用

• 作者: 丁忠福 孙东 宁静 崔亮亮 李秀娜 李秀琳
• 来源期刊: 蛇志
• 学科: 医学
• 关键词: 矛头蝮蛇血凝酶 巴曲亭 酶联免疫吸附法 种属特异性
• 年，卷（期）: 2016,（2）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 117-120
• 页数: 4页
• 分类号: R996.3
• 字数: 3872字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-5639.2016.02.001

摘要

目的 建立间接ELISA法定性检测矛头蝮蛇血凝酶,用于巴曲亭蛇毒种属来源检测.方法 将矛头蝮蛇血凝酶为抗原免疫小鼠,与尖吻蝮蛇血凝酶、白眉蝮蛇血凝酶交叉筛选获得特异性单克隆抗体.优化矛头蝮蛇血凝酶单抗(一抗)、HRP标记的羊抗鼠(二抗)IgG、矛头蝮蛇血凝酶(抗原)工作浓度,建立间接ELISA检测方法.考察方法的重复性、中间精密度,确定方法的适用性.采用膜超滤法将巴曲亭中辅料去除,按照建立的ELISA法检测,判定种属来源.结果 矛头蝮蛇血凝酶单抗具有强特异性,一抗的最佳工作浓度1∶4000(250 ng),二抗的最佳工作浓度1∶4000(250 ng),抗原浓度2μg/孔,该法重复性和中间精密度较好.巴曲亭与矛头蝮蛇血凝酶单抗有特异性反应,与其它蛇毒来源血凝酶单抗无交叉反应,确定巴曲亭来源于矛头蝮蛇蛇毒.结论 本研究建立的ELISA法具有较好的特异性,可作为巴曲亭蛇毒种属来源判断的方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李秀琳		5	3	1.0	1.0
2	李秀娜		4	1	1.0	1.0
3	丁忠福		5	3	1.0	1.0
4	崔亮亮		5	3	1.0	1.0
5	孙东		3	2	1.0	1.0
6	宁静		2	2	1.0	1.0