一种检测2′－甲基－6′－乙基－2－氯乙酰苯胺水解酶活性的方法

• 作者: 崔中利 李周坤 王飞 董维亮
• 来源期刊: 生态与农村环境学报
• 学科: 地球科学
• 关键词: 2-甲基-6-乙基苯胺(MEA) 4-氨基安替比林显色法 分光光度法 Delftia acidovorans T3-6
• 年，卷（期）: 2016,（4）
• 所属期刊栏目: 研究方法
• 页码范围: 682-686
• 页数: 5页
• 分类号: X592
• 字数: 4346字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11934/j.issn.1673-4831.2016.04.026

摘要

建立了一种快速测定Delftia acidovorans T3－6菌株2′－甲基－6′－乙基－2－氯乙酰苯胺（ CMEPA）水解酶活性的方法。在20 mmol·L－1 Tris－HCl（ pH 值为7?0）缓冲液中，10～50μmol·L－1的CMEPA水解产物2－甲基－6－乙基苯胺（MEA）在铁氰化钾催化下与4－氨基安替比林反应生成紫红色物质，该物质在535 nm处的吸光度（y）与MEA浓度（ x）呈正相关（ y＝0?0146x－0?0054，R2＝0?9988）。底物CMEPA、十二烷基硫酸钠（ SDS）、甲醇等有机试剂以及1 mmol·L－1金属离子对显色反应无显著影响，温度和pH值对显色反应影响显著。4－氨基安替比林显色法对菌株T3－6粗酶液酶活性的测定结果与二氯甲烷萃取－紫外分光光度法无显著差异。该方法也适用于其他苯胺苯酚类衍生物的测定。