鸡新城疫病毒(NDV-XX08)单克隆抗体的制备与鉴定

• 作者: 丰兰竹 周洁 孔令芸 岳锋 张秋雨 王选年 银梅
• 来源期刊: 中国兽医杂志
• 关键词: 鸡 新城疫病毒 单克隆抗体 Western-Blotting
• 年，卷（期）: 2016,（2）
• 所属期刊栏目: 调查研究
• 页码范围: 3-5,8
• 页数: 4页
• 分类号: S852.65+9.5
• 语种: 中文

摘要

本研究采用鸡胚繁殖NDV-XX08,差速离心法纯化NDV,用纯化的病毒免疫BALB/c小鼠.取免疫小鼠的脾细胞与NSO细胞进行融合,用间接ELlSA和血凝抑制试验(HI)进行筛选,挑选效价高的杂交瘤细胞进行克隆和亚克隆,建立阳性杂交瘤细胞株,最终得到一株稳定分泌抗体的杂交瘤细胞,命名为4F12.采用体外细胞培养和体内诱生腹水的方法制备了其McAb.对获得的单克隆抗体采用ELISA,HI,Western-Blotting方法进行鉴定.杂交瘤细胞培养上清和腹水的ELISA效价分别为1∶160和1:3.2×104.获得的单克隆抗体与NDV具有良好的特异性反应,与鸡胚阴性尿囊液、鸡正常组织、鸡IgG、鸡传染性囊病病毒、鸡传染性支气管炎病毒、禽流感检测抗原均无交叉反应性.HI试验表明,制备的单抗没有血凝抑制活性.Western-Blotting证明获得的单抗与新城疫病毒蛋白有特异性反应.经连续传代20次,冻存、复苏3次,4F12杂交瘤细胞株仍能稳定分泌抗体.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	银梅	河南科技学院动物科学学院	79	233	8.0	11.0
2	王选年	新乡学院生命科学技术学院	26	90	5.0	9.0
3	张秋雨	河南科技学院动物科学学院	13	38	4.0	5.0
4	周洁	河南科技学院动物科学学院	14	28	3.0	5.0
5	孔令芸	河南科技学院动物科学学院	7	18	3.0	4.0
6	岳锋	新乡学院生命科学技术学院	12	31	3.0	5.0
7	丰兰竹		2	3	1.0	1.0