微量生物样品中糖蛋白N-糖链电喷雾电离质谱分析前处理方法的建立

• 作者: 刘影 刘洋 张英 强珊 杨冰莹 王仲孚 黄琳娟
• 来源期刊: 分析化学
• 关键词: 微量分析 糖蛋白 N-糖链 电喷雾质谱 前处理
• 年，卷（期）: 2016,（2）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 265-272
• 页数: 8页
• 字数: 5249字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11895/j.issn.0253-3820.150119

摘要

基于电喷雾电离质谱检测技术,建立了一种可靠、高效、简单,适合于微量糖蛋白N-糖链解离、富集纯化的方法.以糖蛋白牛胰核糖核酸酶(Rib B)和卵清白蛋白(OVA)为模型蛋白直接酶解,比较了4种方法纯化酶解样品的效果.比较了直接酶解和经过聚偏氟乙烯(PVDF)膜富集后酶解微量复杂生物来源样品胎牛血清的酶解效果,最终建立了微量生物样品中糖蛋白N-糖链的质谱分析前处理方法.采用PVDF膜吸附复杂生物样品中的糖蛋白,N-糖苷酶F(PNGase F)酶直接在膜上完成糖链释放(37℃,24 h),采用微晶纤维素柱结合石墨碳柱对糖链进行富集纯化,用于微克级胎牛血清和健康人血清中N-糖链质谱分析的前处理.本方法通用性好,在微量生物样品糖链质谱分析检测的前处理方面具有一定应用价值.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘洋	西北大学生命科学学院	32	109	4.0	10.0
2	黄琳娟	西北大学生命科学学院	20	270	9.0	16.0
3	王仲孚	西北大学生命科学学院	21	202	8.0	14.0
4	张英	西北大学生命科学学院	14	41	4.0	6.0
5	刘影	西北大学生命科学学院	1	2	1.0	1.0
6	强珊	西北大学生命科学学院	1	2	1.0	1.0
7	杨冰莹	西北大学生命科学学院	1	2	1.0	1.0