bcl-2基因修饰神经干细胞移植修复大鼠脊髓损伤

• 作者: 侯晓华 刘庆阳 张梅 李岩 殷胜春 洪军 王跃新
• 来源期刊: 中国比较医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 脊髓损伤 bcl-2 基因 修饰 神经干细胞 移植 修复 大鼠 神经功能
• 年，卷（期）: 2016,（7）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 35-41
• 页数: 7页
• 分类号: R-332
• 字数: 4924字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969.j.issn.1671-7856.2016.07.006

摘要

目的：探讨bcl?2基因修饰神经干细胞移植对脊髓损伤大鼠损伤神经功能恢复的影响。方法体外培养大鼠神经干细胞，经Ad?EGFP为载体介导端B淋巴细胞瘤?2基因（bcl?2）基因转染神经干细胞，分为3组：对照组、阴性转染组、bcl?2转染组。 Western?blot检测神经干细胞在转染前后bcl?2蛋白的表达。成年雌性SD大鼠85只，造模成功72只，随机分为对照组，NSCs组，bcl?2?NSCs组，24只／组，按照改良的Allen打击法建立大鼠急性脊髓损伤模型。通过BBB评分、斜板试验进行运动功能评定。造模后7 d通过RT?PCR及Western?blot检测检测脊髓损伤区周围HSP27、c?fos基因的表达，TUNEL法检测细胞凋亡情况。造模后4周取材行病理切片HE染色及荧光显微镜观测EGFP标记的NSC存活及分布情况，通过SEP和MEP观察大鼠神经电生理恢复情况。结果 bcl?2基因转染大鼠神经干细胞后，bcl?2转染组与对照组、阴性转染组相比bcl?2基因和蛋白水平均有表达（ P ＜0．05）；大鼠下肢运动功能评价bcl?2?NSCs组优于NSCs组，NSCs组优于对照组。造模后72 h，bcl?2?NSCs组细胞凋亡数均明显低于对照组和NSCs组（P ＜0．05）。造模后7 d，与对照组和NSCs组相比，bcl?2?NSCs组HSP27基因和蛋白的表达均较显著升高（P ＜0．05），bcl?2?NSCs组c?fos基因和蛋白的表达较显著降低（P ＜0．05）。造模后4周，HE染色对照组可见脊髓组织缺失及脊髓空洞形成，无神经轴索通过。 NSCs组损伤区可见少量神经轴索样结构，脊髓空洞较小，bcl?2?NSCs组可见较多神经轴索样结构，未见脊髓空洞。 EGFP标记的阳性细胞数：bcl?2?NSCs组最多， NSCs组次之，对照组未见，且各组之间差异有显著性（P ＜0．05）。造模后4周，SEP和MEP的潜伏期：bcl?2?NSCs组＜NSCs组＜对照组，且各组之间差异有显著性（P ＜0．05）；波幅：bcl?2?NSCs组＞NSCs组＞对照组，且各组之间差异有显著性意义（P ＜0．05）。结论通过Ad?EGFP为载体介导端B淋巴细胞瘤?2基因（bcl?2）基因转染使神经干细胞能够促进体外培养的大鼠神经干细胞增殖。bcl?2基因修饰神经干细胞移植可促进脊髓损伤大鼠神经突触的再生，升高脊髓损伤区HSP27表达，降低脊髓损伤区bcl?2基因的表达和神经细胞凋亡，改善大鼠的肢体运动功能和电生理功能。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	殷胜春		4	12	2.0	3.0
2	侯晓华		7	64	4.0	7.0
3	洪军		12	72	5.0	8.0
4	王跃新		4	14	2.0	3.0
5	刘庆阳		9	22	3.0	4.0
6	李岩		6	19	3.0	4.0
7	张梅		2	13	2.0	2.0