烟草 NtWRKY40在植物应答病毒侵染过程中的作用

• 作者: 刘晶晶 席玉珍 程春玲 魏书
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: 烟草花叶病毒 马铃薯 Y 病毒 WRKY 转录因子 人工 miRNA 抗病毒
• 年，卷（期）: 2016,（10）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 188-198
• 页数: 11页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2016.10.023

摘要

WRKY 转录因子家族在植物的抗病、抗逆反应中具有重要功能。已有研究表明，烟草花叶病毒（TMV）的侵染显著地诱导烟草 NtWRKY 的表达，有必要进一步探明该基因在植物应答病毒侵染过程中的作用。采用 PCR 的方法克隆获得 NtWRKY cDNA，生物信息学分析结果显示，该基因属于 WRKY Ⅱ a 亚族成员，与绒毛状烟草 NtoWRKY40高度同源，命名为 NtWRKY40。以此建立了过表达该基因的转基因烟草，并以 TMV 为毒源进行了转基因烟草和野生烟草的侵染实验，以观察 NtWRKY40在烟草应答病毒侵染过程中的作用。实验结果表明，野生烟草在 TMV 侵染后9 d，NtWRKY40的表达量显著升高，而 NtWRKY40过表达转基因烟草在病毒侵染后，病毒相关基因的表达高于野生型对照，与染病程度成正相关，说明过表达 NtWRKY40增加了植株对病毒的敏感性，该基因为负调控因子。此外，为探索应用人工 miRNA 的抗病毒技术，以烟草天然 miR167前体为骨架、马铃薯 Y 病毒（PVY）外壳蛋白基因的一段反向互补序列为成熟序列，构建了 amiR167-PVY 植物表达载体并转化烟草，以抑制 PVY。对 amiRNA 转基因植株进行抗病毒实验的结果显示，amiR167-PVY 能够部分抑制病毒基因的表达，转基因植株具有一定的抗病毒能力。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	魏书	安徽农业大学茶树生物学与资源利用国家重点实验室	6	8	2.0	2.0
2	刘晶晶	安徽农业大学茶树生物学与资源利用国家重点实验室	4	13	2.0	3.0
3	席玉珍	安徽农业大学茶树生物学与资源利用国家重点实验室	2	8	2.0	2.0
4	程春玲	安徽农业大学茶树生物学与资源利用国家重点实验室	1	5	1.0	1.0