NDY1shRNA真核表达质粒构建及其在卵巢癌A2780细胞中的稳定表达

• 作者: 况燕 卢芳芳 徐朝欢 李美仪 王旗
• 来源期刊: 重庆医学
• 学科: 医学
• 关键词: 卵巢肿瘤 NDY1 质粒构建 A2780细胞
• 年，卷（期）: 2016,（8）
• 所属期刊栏目: 论著?基础研究
• 页码范围: 1012-1015
• 页数: 4页
• 分类号: R737.31
• 字数: 3272字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-8348.2016.08.002

摘要

目的：构建NDY1 shRNA真核表达载体，并获得稳定表达shNDY1质粒的卵巢癌A2780细胞。方法根据Gen‐Bank数据库提供的NDY1基因核苷酸序列，设计并合成靶向干扰NDY1基因的小发夹RNA（shRNA）序列，插入表达载体获得重组质粒pGPU6／GFP／Neo‐shNDY1。重组质粒测序鉴定正确后，脂质体介导转染A2780细胞，经G418筛选及有限稀释法获得稳定转染细胞，采用实时定量聚合酶链反应法（RT‐qPCR）和蛋白免疫印迹法分别检测A2780稳定转染细胞NDY1 mRNA及蛋白表达。结果重组质粒测序正确，转染shNDY1后，A2780细胞mRNA及蛋白表达水平分别下降（72．89±4．83）％及（55．85±4．84）％，与对照组相比差异有统计学意义（ P＜0．05）。结论成功构建 pGPU6／GFP／Neo‐shNDY1真核表达质粒，并获得shNDY1稳定转染的卵巢癌A2780细胞，为细胞水平研究NDY1与卵巢癌的关系奠定实验基础。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	况燕	广西医科大学第一附属医院妇产科	33	137	8.0	10.0
2	李美仪	广西医科大学第一附属医院妇产科	4	19	2.0	4.0
3	卢芳芳	广西医科大学第一附属医院妇产科	5	13	1.0	3.0
4	徐朝欢	广西医科大学第一附属医院妇产科	3	34	2.0	3.0
5	王旗	广西医科大学第一附属医院妇产科	2	0	0.0	0.0