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摘要:
目的 利用DNA重组技术,在大肠杆菌中获得融合表达的鼠疫耶尔森氏菌caf1及pH6抗原基因. 方法 利用分子克隆技术克隆后,在原核系统中表达鼠疫菌重要功能蛋白car1及pH6蛋白,根据云南玉龙菌株(D106004)全基因组序列设计引物,PCR扩增目的基因片段;采用pET-32a(+)作为表达载体,通过双酶切和连接反应,将目的基因片段定向插入载体中,构建重组表达质粒;IPTG诱导,使重组质粒在其宿主菌E.coli BL21 (DE3)中表达. 结果 根据酶切鉴定和PCR产物测序结果显示,目的基因caf1及pH6已成功连接到表达载体pET-32a(+)上,SDS-PAGE结果显示表达产物的相对分子质量约为34.2 ku和35.5 ku,与理论分子量一致. 结论成功克隆并构建了pET32a-car1及pET32a-pH6重组基因原核表达系统,为鼠疫潜在诊断靶点及新型疫苗选择的可能性奠定了基础.
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文献信息
篇名 鼠疫耶尔森氏菌caf1和pH6基因的原核表达
来源期刊 疾病预防控制通报 学科 医学
关键词 鼠疫耶尔森氏菌 抗原基因,caf1,pH6 克隆表达
年,卷(期) 2016,(1) 所属期刊栏目 调查研究与实验研究
研究方向 页码范围 24-27
页数 4页 分类号 R378.61
字数 语种 中文
DOI 10.13215/j.cnki.jbyfkztb.1511016
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 张渝疆 21 67 6.0 7.0
2 郭荣 3 3 1.0 1.0
3 刘青 2 0 0.0 0.0
4 古丽阿依·包开西 3 0 0.0 0.0
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研究主题发展历程
节点文献
鼠疫耶尔森氏菌
抗原基因,caf1,pH6
克隆表达
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研究来源
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疾病预防控制通报
双月刊
1000-3711
65-1102/R
大16开
新疆乌鲁木齐市碱泉一街380号
58-95
1986
chi
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