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摘要:
目的:探讨在双孔钾离子通道(K2P)TREK-1(TWIK related K + channel 1)分子间加入柔性 linker 构建串联二聚体载体的可行性。方法利用 PCR 技术在两个单体 TREK-1分子之间加入一个 linker,构建串联二聚体载体(pGH19-tdTREK-1)。将上述载体体外转录成 cRNA 并显微注射至爪蟾卵母细胞,培养24~48 h 后采用双电极电压钳技术记录电流。观察胞外钡离子和不同 pH 值外液对该串联二聚体通道表达的影响,并与天然二聚体通道的反应相比较。结果串联二聚体 TdTREK-1可在爪蟾卵母细胞中高效表达,该通道形成的电流可被胞外钡离子抑制,也可被胞外液酸化所抑制,而该串联二聚体通道对这些胞外刺激因素的反应程度与天然二聚体相似。结论人为加入柔性 linker 序列构建串联二聚体 TREK-1通道并不影响通道的表达及门控特性,证明该实验方案可行。这将为操作单个亚基,进而深入研究 TREK-1的结构与功能打下良好的基础。
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文献信息
篇名 双孔钾离子通道TREK-1功能性串联二聚体载体的构建
来源期刊 军事医学 学科 生物学
关键词 TREK-1 串联二聚体 双电极电压钳 门控特性 双孔钾离子通道
年,卷(期) 2016,(9) 所属期刊栏目 论 著
研究方向 页码范围 733-737
页数 5页 分类号 Q78
字数 4542字 语种 中文
DOI 10.7644/j.issn.1674-9960.2016.09.010
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 袁维秀 解放军总医院麻醉手术中心 44 293 9.0 15.0
2 郑建全 军事医学科学院毒物药物研究所 78 220 7.0 10.0
3 魏晓莉 军事医学科学院毒物药物研究所 32 147 7.0 11.0
4 马晓芸 军事医学科学院毒物药物研究所 16 15 2.0 3.0
5 彭鹏 解放军总医院麻醉手术中心 5 11 1.0 3.0
9 卓仁恭 军事医学科学院毒物药物研究所 3 3 1.0 1.0
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研究主题发展历程
节点文献
TREK-1
串联二聚体
双电极电压钳
门控特性
双孔钾离子通道
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
军事医学
月刊
1674-9960
11-5950/R
大16开
北京太平路27号
82-757
1956
chi
出版文献量(篇)
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总下载数(次)
13
总被引数(次)
15987
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