p21基因在野生型斑马鱼胚胎发育过程中的表达

• 作者: 何志旭 吴西军 周艳华 姬牧远 宋锦 舒莉萍
• 来源期刊: 贵州医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: p21 斑马鱼 胚胎 发育 探针 质粒
• 年，卷（期）: 2016,（7）
• 所属期刊栏目: 专题研究
• 页码范围: 765-769
• 页数: 5页
• 分类号: R394.3
• 字数: 3595字
• 语种: 中文
• DOI: 10.19367/j.cnki.1000-2707.2016.07.005

摘要

目的：探究p21基因在斑马鱼早期发育过程中的表达。方法：Trizol法提取野生型斑马鱼胚胎总RNA，RT-PCR法扩增p21基因片段，与pCS2﹢载体重组构建p21-pCS2﹢重组质粒，以T3 RNA 聚合酶制备地高辛标记的反义mRNA 探针，通过斑马鱼全胚胎原位杂交检测p21基因在野生型斑马鱼胚胎早期发育过程中的表达。结果：成功构建了p21-pCS2﹢重组质粒，并制备反义mRNA 探针；原位杂交结果显示野生型斑马鱼0.5~18 hpf的胚胎均未发现p21基因阳性杂交信号，24~36 hpf 胚胎可在脊索部位观察到阳性信号，48~72 hpf 胚胎可在头部胸腺附近观察到阳性信号，表达量均较低。结论：成功制备了p21-pCS2﹢重组质粒及斑马鱼p21基因反义mRNA 探针，p21基因在野生型斑马鱼胚胎不同发育时相中表达水平不同。