洋葱不同组织RNA提取方法比较分析

• 作者: 帅强 张仕林 王建军 许玉超 邓鹏
• 来源期刊: 江苏农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 洋葱 总RNA RNA提取 RT-PCR
• 年，卷（期）: 2016,（10）
• 所属期刊栏目: 生物技术
• 页码范围: 95-97
• 页数: 3页
• 分类号: S633.201
• 字数: 3694字
• 语种: 中文
• DOI: 10.15889/j.issn.1002-1302.2016.10.022

摘要

探讨洋葱不同组织总RN A提取的最优方法，以期为今后开展洋葱的分子生物学研究奠定基础。以洋葱品种W470发育旺盛时期的叶片、根、鳞茎为材料，比较TaKaRa试剂盒法、TIANGEN试剂盒法、TRIzol法、pBIOZOL法等4种RNA提取方法提取洋葱RNA的效果。凝胶电泳结果显示，除了TIANGEN试剂盒法不能提取洋葱根的总RNA，其他方法在洋葱不同组织中均可提取到不同质量的RNA。对不同方法提取洋葱RNA浓度、纯度进行检测发现，TaKa-Ra试剂盒法提取洋葱叶片的总 RNA 浓度为342．31μg／g，pBiozol 法提取洋葱鳞茎、根的总 RNA 浓度分别为1119．39、171．85μg／mL。经RT－PCR验证，TaKaRa试剂盒法提取的洋葱叶片总RNA、pBIozol法提取洋葱鳞茎、根的总RNA均成功扩出洋葱β－actin基因片段。由结果可知，TaKaRa试剂盒适合提取洋葱叶片的总RNA，pBIOZOL法适合提取洋葱鳞茎、根的总RN A且质量能够满足后续试验要求。