微小核糖核酸-24对内皮型一氧化氮合酶基因表达的调节及其对血管内皮细胞管腔形成的影响

• 作者: 杨鹏 欧和生 王辉 罗雪兰 莫国君 陈伟
• 来源期刊: 中国循环杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 核糖核酸 管腔 一氧化氮合酶,内皮型
• 年，卷（期）: 2016,（8）
• 所属期刊栏目: 基础与实验研究
• 页码范围: 797-801
• 页数: 5页
• 分类号: R54
• 字数: 5113字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-3614.2016.08.017

摘要

目的：探讨微小核糖核酸（microRNA）-24（miR-24）对内皮型一氧化氮合酶（eNOS）基因表达调节的分子机制及其对血管内皮细胞增殖、迁移和管腔形成能力的影响。方法：构建miR-24及其反义序列的高表达质粒，分别转染人脐静脉内皮细胞（HUVECs），根据转染质粒将实验细胞分为：miR-24高表达组、miR-24干扰组和空白质粒对照组。用四甲基偶氮唑盐（MTT）检测HUVECs增殖能力，划痕和Transwell试验检测细胞的迁移能力，人工基底膜检测细胞的管腔形成能力；分别用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）、蛋白免疫印迹法（Western blotting）检测eNOS和Sp1转录因子mRNA和蛋白表达水平。结果：（1）与空白质粒对照组比较，miR-24高表达组细胞增殖能力降低45.45%（0.36±0.04 vs 0.66±0.08， P<0.05）；miR-24高表达组细胞迁移速度明显减缓，且迁移数目降低74.75%（30.25±3.78 vs 119.80±10.94， P<0.01），未能形成明显管腔样结构。（2）与空白质粒对照组比，miR-24高表达组eNOS mRNA降低46.2%（0.49±0.02 vs 0.91±0.01，P<0.05），蛋白表达减少49.07%（0.55±0.05 vs 1.08±0.05，P<0.05）；同时Sp1 mRNA降低44.9%（0.49±0.01 vs 0.89±0.02，P<0.05），其蛋白质表达量也相应减少54.90%（0.46±0.02 vs 1.02±0.04，P<0.05）。在miR-24抑制组中，上述指标较空白质粒对照组降低，但比miR-24高表达组显著升高，特别是小管形成数量、及管腔长度与空白质粒对照组相近。结论： miR-24显著抑制HUVECs的增殖、迁移和管腔形成的能力，并且与miR-24对eNOS的表达调控有关； miR-24明显抑制eNOS表达，Sp1的参与可能是这一调节过程的重要分子机制之一。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈伟	广西医科大学药学院	33	190	8.0	11.0
2	罗雪兰	广西医科大学药学院	11	94	5.0	9.0
3	莫国君	广西医科大学药学院	9	36	4.0	5.0
4	杨鹏	广西医科大学药学院	10	36	4.0	5.0
5	欧和生	广西医科大学药学院	27	72	5.0	6.0
6	王辉	广西医科大学药学院	17	54	5.0	6.0