BMPR-IB基因的克隆及其在绒山羊成纤维细胞中的表达

• 作者: 刘月琴 孙洪新 张英杰 敦伟涛 王红娜 陈晓勇
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: BMPR-IB基因 真核表达载体 绒山羊成纤维细胞 表达
• 年，卷（期）: 2016,（6）
• 所属期刊栏目: 遗传繁育
• 页码范围: 1124-1132
• 页数: 9页
• 分类号: S827|S813.3
• 字数: 6685字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11843/j.issn.0366-6964.2016.06.006

摘要

本研究旨在克隆BB基因型小尾寒羊的BMPR-IB基因编码区,构建重组载体,瞬时转染绒山羊成纤维细胞,并对BMPR-IB等基因的表达情况进行检测.采用RT-PCR方法扩增BMPR-IB基因完整编码区,构建真核表达载体pEGFP-BMPR-IB,经脂质体Lipofectamine LTX&PLUS介导转染绒山羊成纤维细胞,并分别于转染后48和72 h收集细胞,分别提取RNA和蛋白,利用RT-PCR和Western blot方法检测相关基因的表达情况.结果扩增得到了包含BMPR-IB基因完整编码区全长在内的1 550 bp片段,与已知序列高度同源;Real-time PCR检测结果均表明,转基因组细胞中BMPR-IB表达量显著高于空白对照组(P＜0.01),IGF-Ⅰ基因表达量也显著上调(P＜0.01),TLR4、IFN、MHC、PNRP、GDF5、INH基因的表达量显著降低(P＜0.01);Western blot检测表明,转染组BMPR-IB、IGF-Ⅰ的表达有所增加,BMP4、TLR4的表达略有降低,但差异均不显著(P＞0.05).本研究成功实现了小尾寒羊BMPR-IB基因在山羊成纤维细胞中的表达,为转BMPR-IB基因阳性细胞株和细胞系的建立提供了基础;研究表明BMPR-IB(BB型)基因的过表达能上调IGF-Ⅰ基因的表达,下调TLR4基因的表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张英杰	河北农业大学动物科技学院	212	788	13.0	19.0
2	孙洪新	河北农业大学动物科技学院	74	411	10.0	17.0
4	刘月琴	河北农业大学动物科技学院	171	654	12.0	18.0
5	陈晓勇		59	214	8.0	10.0
6	敦伟涛		58	206	8.0	10.0
7	王红娜	河北农业大学动物科技学院	18	37	4.0	5.0