快速检测猪链球菌的环介导等温扩增方法

• 作者: 刘志杰 邱宏 郑瀚
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 猪链球菌 dnaN LAMP
• 年，卷（期）: 2016,（6）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 539-546
• 页数: 8页
• 分类号: R378.1
• 字数: 1068字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2016.06.007

摘要

目的 建立猪链球菌(S.suis)的环介导等温扩增方法(LAMP).方法 通过BLASTn序列比对确定较为保守的S.suis种特异基因,用软件PrimerExplorer V4设计针对靶基因的LAMP试验引物;分别用煮沸法和试剂盒提取法提取基因组做敏感性试验,并用62株非S.suis菌株评价了实验的特异性;再用100株分离自不同地区不同时间的S.suis菌株评价该方法的可靠性.结果 确定了S.suis种特异性基因dnaN为靶基因,并针对该基因建立了检测S.suis的LAMP方法.敏感性实验中,每个反应的检测下限是31.25 fg纯DNA,相当于14个拷贝;煮沸法的检测下限是每个反应27 CFU.在对62株非S.suis菌株与有争议的S.suis菌株的特异性评价实验中,未发现有假阳性.结论 成功建立了针对dnaN基因检测S.suis的LAMP方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	邱宏		2	3	1.0	1.0
5	刘志杰	中国疾病预防控制中心传染病预防控制所	1	1	1.0	1.0
6	郑瀚	中国疾病预防控制中心传染病预防控制所	1	1	1.0	1.0