基于中心组合设计和响应面分析的血清替代物浓度优化?

• 作者: 蔡海波 谭文松 陈小东
• 来源期刊: 高校化学工程学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 细胞因子诱导杀伤细胞 无血清培养基 血清替代物 响应面分析
• 年，卷（期）: 2016,（6）
• 所属期刊栏目: 生物化工
• 页码范围: 1328-1334
• 页数: 7页
• 分类号: Q2-33
• 字数: 4348字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1003-9015.2016.00.032

摘要

细胞因子诱导杀伤细胞(Cytokine-induced killer cells，CIK cells)是一类广泛应用的肿瘤过继免疫疗法的效应细胞，其体外扩增过程中常需要使用无血清培养基。今以胰岛素、亚麻酸、胆固醇和乙醇胺4种可替代血清促进细胞扩增的组份为研究对象，采用中心组合设计和响应面分析相结合的方法，考察上述组分的浓度以及相互作用对单个核细胞扩增的影响，得到了可支持单个核细胞扩增的最优浓度，分别为10、5.66、19.86和1.22 mg?L?1。将上述4种组分以优化的浓度添加到DMEM/F12和IMDM以1：1体积比混合而成的基础培养基中，制成无血清培养基Optimizer。以含10%FBS的RPMI 1640为对照，采用半量稀释法培养脐血单个核细胞，以培养14天的总细胞扩增倍数、细胞组成、CD3+CD56+细胞扩增倍数以及对K562细胞的杀伤活性为指标，评价了制成的无血清培养基Optimizer支持CIK细胞扩增的效果。结果显示，采用所制备的无血清培养基 Optimizer，总细胞扩增倍数为56.54±18.87，明显高于 SFM1的5.14±1.03(p<0.05)和SFM2的3.59±0.56(p<0.05)，与含10%FBS的RPMI 1640的35.24±20.92(p>0.05)接近；CD3+细胞为97.98%±1.41%，与含10%FBS的RPM I1640的94.34%±1.29%相当(p>0.05)；尽管CD3+CD56+细胞比例18.17%±7.38%低于含10% FBS 的 RPMI 1640中的数值25.49%±3.35%(p<0.05)，但两种培养基的 CD3+CD56+细胞扩增倍数分别为440.86±222.89和429.27±249.16，没有显著性差异(p>0.05)；当效靶分别为9：1时分别采用两种培养基扩增的细胞对K562细胞的杀伤活性均能达到50%以上。该研究结果为用于CIK细胞体外扩增的无血清培养基的开发提供了依据。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	蔡海波	华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室	42	134	7.0	10.0
2	谭文松	华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室	142	699	13.0	17.0
3	陈小东	华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室	4	10	2.0	2.0