蛋白质内含子介导蛛丝功能化平台的建立

• 作者: 孟清 林森珠 陈格飞
• 来源期刊: 生物工程学报
• 关键词: 重组蜘蛛丝 断裂蛋白质内含子 功能化修饰 重组葡萄状腺丝蛋白 小分子泛素相关修饰蛋白
• 年，卷（期）: 2016,（12）
• 所属期刊栏目: 生物技术与方法
• 页码范围: 1704-1714
• 语种: 中文
• DOI: 10.13345/j.cjb.160157

摘要

为建立高效快捷的蛛丝功能化修饰平台,蛋白质内含子的反式剪接技术被首次应用于重组蛛丝的功能化修饰.在体外通过Ssp DnaB的反式剪接作用,在蛋白质水平上将12 kDa泛素相关修饰蛋白(SUMO)与蛛丝蛋白(W2CT)连接形成功能化蛛丝蛋白SUMOW2CT.修饰后SUMOW2CT与W2CT均能形成纳米至微米级的丝纤维,但SUMOW2CT自动成丝速度明显下降且产量约为W2CT的一半.与W2CT丝纤维(W)相似,SUMOW2CT丝纤维(UW)不具有超收缩能力和对2％SDS不耐受,但机械性能低于W2CT丝纤维.功能化蛋白SUMOW2CT形成的丝纤维中SUMO蛋白仍保持着正确三维结构,可被SUMO蛋白酶酶切.外源功能化蛋白质虽在一定程度上降低了丝的形成速度和机械性能,但修饰上的功能化蛋白仍保持着生物活性,表明断裂蛋白质内含子介导的蛛丝修饰平台成功建立,也为蛛丝的功能化修饰和应用奠定了坚实的技术基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孟清	东华大学生物科学与技术研究所	43	52	5.0	6.0
2	林森珠	东华大学生物科学与技术研究所	4	12	2.0	3.0