RNA干扰下调MBP-1对骨肉瘤Saos-2细胞生物学的影响

• 作者: 任雯 周雅丽 施星臣 施鑫鹤 朱宏文 耿晢 马克君
• 来源期刊: 中国医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 骨肉瘤Saos-2细胞 RNA干扰 c-myc启动子结合蛋白1 细胞生长
• 年，卷（期）: 2016,（7）
• 页码范围: 604-609
• 页数: 6页
• 分类号: R738.3
• 字数: 4208字
• 语种: 中文
• DOI: 10.12007/j.issn.0258-4646.2016.07.007

摘要

目的：探讨c?myc启动子结合蛋白1（MBP?1）基因沉默对人骨肉瘤Saos?2细胞生长的影响。方法实验分为3组：正常对照组（未转染骨肉瘤细胞）、阴性对照组（转染错义序列组）和沉默组（转染MBP?1 shRNA组）。设计2条MBP?1基因的RNA干扰片段及1条阴性对照siRNA，并与pSIREN?retroQ质粒连接。将重组pSIREN?retroQ质粒通过Lipofectamine 2000脂质体转染骨肉瘤Saos?2细胞。实时PCR和Western blot分别检测MBP?1表达。CCK?8法对MBP?1沉默后骨肉瘤Saos?2细胞生长进行检测。Western blot检测对照组和沉默组cyclin D1和cyclin E的表达。结果通过PCR扩增及测序，说明已成功构建MBP?1沉默及对照重组pSIREN?retroQ 质粒。实时PCR结果显示，沉默组MBP?1 mRNA相对表达量与对照组相比显著下调（P<0.05）。Western blot结果显示，沉默组MBP?1蛋白表达量与对照组相比也显著下调。CCK?8法结果表明，沉默组细胞在48、72和96 h时增殖能力均比对照组显著升高（P<0.05）。沉默组cyclin D1和cyclin E的表达显著高于对照组（P<0.05）。结论 MBP?1基因沉默后骨肉瘤Saos?2细胞生长被明显促进，为寻找骨肉瘤基因治疗新靶点打下基础。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	施鑫鹤	兰州大学第二医院中心实验室	16	52	5.0	6.0
2	马克君	兰州大学第二医院中心实验室	10	23	2.0	4.0
3	任雯	兰州大学第二医院中心实验室	5	4	2.0	2.0
4	周雅丽	兰州大学第二医院中心实验室	8	24	3.0	4.0
5	耿晢	兰州大学基础医学院生物化学及分子生物学研究所	3	5	2.0	2.0
6	施星臣	兰州第二人民医院骨科	1	2	1.0	1.0
7	朱宏文	兰州大学第二医院中心实验室	1	2	1.0	1.0