肝靶向肽-人内皮抑制素融合蛋白表达条件的优化及活性鉴定

• 作者: 卢建培 李伟 李小波 马艳 鲍冬梅
• 来源期刊: 生物工程学报
• 关键词: 肝靶向肽 人内皮抑制素 表达条件优化 活性鉴定
• 年，卷（期）: 2016,（12）
• 所属期刊栏目: 生物技术与方法
• 页码范围: 1715-1726
• 语种: 中文
• DOI: 10.13345/j.cjb.160177

摘要

为了获得足够多纯度高且有活性的肝靶向肽-人内皮抑制素融合蛋白(HTP-rES),首先研究了BL21/pET21 b-HTP-rES重组菌株的生长曲线和最佳诱导时机;单因素分析不同pH值、不同诱导时间、不同诱导剂浓度、不同诱导温度时融合蛋白表达量;通过包涵体洗涤、复性、纯化,以获得高纯度的肝靶向肽-人内皮抑制素融合蛋白;最后采用流式细胞仪和MTT对融合蛋白进行活性鉴定.结果表明,BL21/pET21 b-HTP-rES重组菌株在1.5-3.5 h处于对数生长期,培养基pH 8.0、IPTG终浓度0.06 mmol/L、42℃、诱导表达5h为最佳表达条件.包涵体洗涤后纯度达60％,经复性、纯化后获得的目的蛋白纯度达到95％以上,对人肝癌细胞具有靶向性,能抑制人脐静脉内皮细胞的增殖.研究确立了融合蛋白最佳表达条件以及复性、纯化条件,为进一步研究其生物学活性及药物开发奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	马艳	广东药科大学基础学院广东省生物活性药物研究重点实验室	8	10	1.0	3.0
2	李小波	广东药科大学基础学院广东省生物活性药物研究重点实验室	10	13	2.0	3.0
3	李伟	广东药科大学中药学院	1	1	1.0	1.0
4	鲍冬梅	广东药科大学基础学院广东省生物活性药物研究重点实验室	1	1	1.0	1.0
5	卢建培	广东药科大学基础学院广东省生物活性药物研究重点实验室	1	1	1.0	1.0