多效生长因子对小鼠子宫基质细胞蜕膜化的影响

• 作者: 于海帆 岳占碰 张虹亮 李当当 杨占清 耿爽 郭传辉 郭斌
• 来源期刊: 吉林大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 多效生长因子 载体构建 转染 蜕膜化 小鼠
• 年，卷（期）: 2016,（5）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 855-859
• 页数: 5页
• 分类号: R318.16
• 字数: 4319字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13481/j.1671-587x.20160503

摘要

目的：构建多效生长因子（PTN）基因过表达载体，研究 PTN 对小鼠子宫基质细胞蜕膜化的影响。方法：根据 GenBank 中已发表的 PTN 基因序列，设计含酶切位点的特异性引物，进行 PCR 扩增及胶回收后，与 pGEM-T 载体连接，经限制性内切酶 EcoRⅠ和 XhoⅠ双酶切后与 pcDNA 3.1（＋）载体融合得到 PTN 过表达质粒，将其转染至体外分离培养的小鼠子宫基质细胞中，利用实时荧光定量 PCR （qRT-PCR）法检测子宫基质细胞中 PTN mRNA 表达水平及 PTN 过表达作用下蜕膜化标志性分子 Prl8a2和 Prl3c1表达水平。对照组为转染pcDNA 3.1（＋）空载体的子宫基质细胞。结果：PTN 过表达质粒经双酶切鉴定后，结果与目的基因条带吻合，测序结果与 GenBank 中小鼠 PTN 基因序列同源性为100％。与对照组比较，PTN 过表达载体组小鼠子宫基质细胞中 PTN、Prl8a2和 Prl3c1 mRNA 表达水平明显升高（P ＜0.05）。结论：PTN 过表达能够使小鼠子宫内膜基质细胞中蜕膜化标志分子的表达水平升高，提示 PTN 可能在小鼠子宫内膜蜕膜化过程中起促进作用。