FTA-巢式PCR方法鉴定溶组织内阿米巴原虫的初步研究

• 作者: 储言红 卢艳 张永年 李浩 艾琳 蔡玉春 陈家旭 陈韶红
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 溶组织内阿米巴 FTA 巢式PCR 鉴定
• 年，卷（期）: 2016,（2）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 128-132
• 页数: 5页
• 分类号: R382
• 字数: 3390字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2016.02.006

摘要

目的 建立一种简便、快速的FTA-巢式PCR方法用于鉴定粪便中溶组织内阿米巴原虫(Entamoeba histol ytica,E.h).方法 收集门诊腹泻病人新鲜粪便,用光学显微镜进行初步检查.用FTA卡抽提镜检结果为阳性的粪便DNA,根据溶组织内阿米巴原虫的SSU-rRNA序列设计引物,进行巢式PCR扩增,对PCR产物进行琼脂糖凝胶分析,并对阳性产物进行测序和序列比对分析.结果 根据光学显微镜检测结果,挑选了44例镜检结果为阿米巴原虫阳性的腹泻病人粪便.经FTA-巢式PCR扩增,其中20例样本可扩增出427 bp左右的目的条带,目的条带的测序和序列分析结果表明为溶组织内阿米巴原虫.镜检方法与巢式PCR方法的阳性符合率为45.45％(20/44),将E.h与形态学相似的其他内阿米巴原虫进行了鉴定和区分.结论 本研究建立的FTA-巢式PCR方法具有简单、快速、准确等优点,为临床检验和流行病学调查中E.h的鉴别诊断提供了新的技术方法.