人端粒酶反转录酶基因电转染优化培养大鼠前软骨干细胞

• 作者: 彭义 曲家富 曹立海 杜晓健 赵国志
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 干细胞 培养 端粒酶反转录酶 基因 电转染 大鼠 前软骨干细胞
• 年，卷（期）: 2016,（14）
• 所属期刊栏目: 技术与方法 -- 干细胞培养与分化
• 页码范围: 2110-2116
• 页数: 7页
• 分类号: R394.2
• 字数: 6336字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2016.14.020

摘要

背景：将人端粒酶反转录酶转染至目的细胞中，可以提高其端粒酶活性，保持端粒的长度，在调控增殖和分化方面有重要作用。<br>　　目的：探讨人端粒酶反转录酶基因转染对体外培养大鼠前软骨干细胞端粒酶活性及生物学特性的影响。<br>　　方法：体外培养Wistar大鼠前软骨干细胞，以反转录病毒PLXSN 为载体介导人端粒酶反转录酶基因转染，同时设置对照组、阴性对照序列组、转染组。用TRAP-ELISA法检测前软骨干细胞端粒酶活性， RT-PCR、Western blot检测前软骨干细胞人端粒酶反转录酶基因和蛋白的表达，CCK-8法、细胞生长曲线检测细胞生长增殖情况，流式细胞仪测定细胞周期分布的变化。<br>　　结果与结论：①人端粒酶反转录酶基因转染前软骨干细胞48 h，端粒酶活性明显升高；②与对照组、阴性对照序列组相比，转染组人端粒酶反转录酶基因和蛋白水平表达明显，细胞的生长速度明显增快， G0/G1期细胞数减少，S期细胞数增多，差异有显著性意义(P<0.05)；③结果表明，以反转录病毒PLXSN为载体介导人端粒酶反转录酶基因转染使前软骨干细胞端粒酶活性明显升高，能够促进大鼠前软骨干细胞增殖。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵国志	唐山市第二医院足踝外科	20	128	4.0	11.0
2	曲家富	唐山市第二医院足踝外科	37	223	7.0	14.0
3	曹立海	唐山市第二医院足踝外科	30	199	7.0	13.0
4	杜晓健	唐山市第二医院足踝外科	20	146	6.0	12.0
5	彭义	唐山市第二医院足踝外科	19	166	6.0	12.0