斑节对虾含硒谷胱甘肽过氧化物酶基因全长克隆及表达分析

• 作者: 傅明骏 刘文生 唐蕾 江世贵 赵超 邱丽华
• 来源期刊: 水产学报
• 学科: 农学
• 关键词: 斑节对虾 含硒谷胱甘肽过氧化物酶 卵巢发育 Cu2+胁迫
• 年，卷（期）: 2016,（11）
• 页码范围: 1664-1673
• 分类号: Q785|S917.4
• 语种: 中文
• DOI: 10.11964/jfc.20150810046

摘要

为了研究含硒谷胱甘肽过氧化物酶(selenium-dependent glutathione peroxidase,SeGPx)在斑节对虾应激反应和卵巢发育中的作用,实验以斑节对虾肝胰腺转录组数据中筛选获得的Se-GPx基因(Pm Se-GPx)片段为基础,利用RACE技术获得Pm Se-GPx基因的eDNA全长,并对其进行了生物信息学分析;利用荧光定量PCR技术研究了Pm Se-GPx在斑节对虾不同组织、卵巢发育各期、肝胰腺组织在pH9、硫酸铜(Cu2+)应激下的相对表达量和变化趋势.结果显示,Pm Se-GPx基因eDNA全长为959 bp,5’非编码区(UTR)长10bp,开放阅读框(ORF)长639 bp,编码212个氨基酸,310 bp的3'UTR包含一个硒代半胱氨酸插入序列(SECIS),ORF中的密码子209TGA211编码硒代半胱氨酸(selenocysteine,U67).实时定量PCR实验结果表明,Pm Se-GPx在斑节对虾的肝胰腺、卵巢、精巢、心脏等组织中均有表达,其中肝胰腺中表达量显著高于其他组织,卵巢次之;卵巢发育阶段表达结果则显示Pm Se-GPx在卵巢发育各期均有表达,在卵巢Ⅲ期表达量最高,其次是Ⅴ期;在Cu2+胁迫下,其表达量总体呈现先下降后上升然后又下降的趋势;在环境pH为9胁迫下,表达趋势呈现先下降,后回升,然后又下降,再大幅上升的趋势.研究表明,Se-GPx在斑节对虾卵巢发育过程中具有重要作用,且Se-GPx参与斑节对虾对环境理化因子应激的免疫调控.