无乳链球菌鱼源株10 kb基因序列对细菌致病力的影响

• 作者: 丁铭 刘广锦 姚火春 徐跑 朱洁莲 王茹怡 石紫薇 陆承平
• 来源期刊: 微生物学报
• 关键词: 无乳链球菌 10 kb基因序列 基因缺失 斑马鱼感染模型 毒力
• 年，卷（期）: 2016,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 110-119
• 语种: 中文
• DOI: 10.13343/j.cnki.wsxb.20150168

摘要

[目的]在前期比较基因组学分析中,我们发现中国无乳链球菌鱼源株GD201008-001基因组中有一段10 kb基因序列,内含11个未知功能的开放阅读框.为了研究该段基因序列与细菌的致病力的关系,本研究将这段基因进行了全段缺失.[方法]运用链球菌-大肠杆菌穿梭质粒pSET4s,构建了10 kb基因缺失株(△10 kb),并通过生物学性状的比较,细胞粘附试验,斑马鱼攻毒试验和缺失前后毒力相关基因转录水平的检测,评价该序列对无乳链球菌毒力的影响.[结果]经测序证明缺失株△1O kb构建成功,与亲本株GD201008-001相比较,缺失株△10 kb在细菌染色形态、对HEp-2细胞的粘附能力无明显差异,但在培养液中的生长速度略慢;缺失株△10 kb对斑马鱼的毒力明显增强,LD50有极其显著的差异(P＜0.001);编码菌毛骨架蛋白2b的基因(PI-2b)和唾液酸酶基因(neul)在缺失株中的转录水平明显上升.[结论]该序列对无乳链球菌GD201008-001的毒力有显著的影响,可能调控某些毒力基因的转录表达,使细菌的毒力减弱.