家蚕微孢子虫SWP25基因BmN细胞表达质粒的构建及表达

• 作者: 冉瑞法 朱峰 李镇刚 沈中元 肖圣燕 黄平
• 来源期刊: 江苏农业学报
• 学科: 农学
• 关键词: 家蚕微孢子虫 孢壁蛋白SWP25基因 Bac-to-Bac表达系统 重组质粒 转染 融合蛋白表达
• 年，卷（期）: 2016,（5）
• 所属期刊栏目: 遗传育种?生理生化
• 页码范围: 1023-1028
• 页数: 6页
• 分类号: S884.2
• 字数: 3517字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4440.2016.05.011

摘要

本研究旨在构建含家蚕微孢子虫孢壁蛋白基因SWP25的家蚕卵巢细胞（ BmN）表达质粒，检测该基因在宿主细胞中的表达，为在细胞水平筛选与家蚕微孢子虫孢壁蛋白SWP25相互作用的宿主蛋白奠定基础。利用家蚕核型多角体病毒Bac?to?Bac表达系统，将家蚕微孢子虫孢壁蛋白基因SWP25和报告基因EGFP克隆到杆状病毒转移载体pFastBac1中，转化BmDH10Bac感受态细胞并筛选阳性重组质粒用于转染BmN细胞。经PCR技术鉴定，成功获得重组杆状病毒质粒vBmEGFP?SWP25。在转染成功的细胞中可观测到绿色荧光信号。使用Western blot方法在感染重组病毒的家蚕BmN细胞中检测到大小约55000的重组蛋白条带，与理论值一致，表明家蚕微孢子虫孢壁蛋白基因SWP25在BmN中成功表达。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	沈中元		19	114	8.0	10.0