UTX与JMJD3体外转录载体构建及其在小鼠卵母细胞上的验证

• 作者: 刘雪霏 宋丽爽 李光鹏 杨磊 白力格
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 生物学
• 关键词: UTX JMJD3 组蛋白H3赖氨酸27位三甲基化(H3K27me3) 体外转录 显微注射 卵母细胞
• 年，卷（期）: 2016,（8）
• 所属期刊栏目: 专题:动物基因编辑技术
• 页码范围: 1267-1277
• 分类号: Q781
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2016.08.019

摘要

UTX(ubiquitously transcribed tetratricopeptide repeat X chromosome)和JMJD3(jumonji domain containing 3)是组蛋白H3赖氨酸27位三甲基化(histone H3 lysine 27 trimethylation,H3K27me3)去甲基化酶,可以调控动物机体生长、肌肉发育、调节代谢等重要生理功能.本研究根据小鼠(Mus musculus)UTX和JMJD3 mRNA序列设计3对引物,分别构建了体外转录载体pMD19T-T7UTX和pMD19T-T7JMJD3.分别将体外转录mRNA注射进小鼠卵母细胞,并利用免疫荧光方法对H3K27me3进行检测.转录产物经电泳检测,结果显示,UTX与JMJD3条带清晰与预期大小相符;通过显微注射mRNA的卵母细胞,其H3K27三甲基化修饰明显减少.本研究成功构建了UTX与JMJD3体外转录载体,并在细胞水平证明转录产物能够翻译出具有活性的酶,为利用此载体研究UTX与JMJD3在生长发育及相关疾病发生中的机制提供基础资料.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李光鹏	内蒙古大学哺乳动物生殖生物学与生物技术教育部重点实验室	33	99	6.0	9.0
2	杨磊	内蒙古大学哺乳动物生殖生物学与生物技术教育部重点实验室	14	43	3.0	6.0
3	白力格	内蒙古大学哺乳动物生殖生物学与生物技术教育部重点实验室	4	0	0.0	0.0
4	宋丽爽	内蒙古大学哺乳动物生殖生物学与生物技术教育部重点实验室	4	0	0.0	0.0
5	刘雪霏	内蒙古大学哺乳动物生殖生物学与生物技术教育部重点实验室	3	0	0.0	0.0