人膀胱尿路上皮癌细胞DAPK基因启动子甲基化状态与生物学功能之间的关系分析

• 作者: 周强 宋伟 杨金瑞
• 来源期刊: 临床泌尿外科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 膀胱尿路上皮癌 基因治疗 5-氮杂-2'-脱氧胞苷
• 年，卷（期）: 2016,（11）
• 所属期刊栏目: 论著-实验研究
• 页码范围: 1016-1019,1023
• 页数: 5页
• 分类号: R737.14
• 语种: 中文
• DOI: 10.13201/j.issn.1001-1420.2016.11.014

摘要

目的:分析人膀胱尿路上皮癌(BUCC)细胞DAPK基因启动子甲基化状态与生物学功能之间的关系.方法:以中国科学院细胞库提供的BUCC 5637细胞株作为对照组,以经10 μmol/L 5-Aza-CdR处理过的BUCC 5637细胞株作为观察组.应用Western blot、RT-PCR分别检测对照组细胞及观察组细胞中DAPK、DAP-KmRNA的表达;应用MS-PCR检测对照组和观察组中DAPK基因启动子CpG岛的甲基化状态;应用流式细胞术检测对照组及观察组的细胞凋亡率;应用肿瘤细胞侵袭实验检测对照组及观察组的细胞侵袭能力.结果:①对照组细胞中DAPK的表达为146.32±21.24,显著低于观察组的312.15±14.57,差异有统计学意义(t=3.582,P=0.024);②对照组细胞中的DAPKmRNA表达水平为0.38±0.07,显著低于观察组的0.82±0.04,差异有统计学意义(t=4.257,P=0.032);③对照组细胞中DAPK启动子基因CpG岛甲基化状态为阳性,而观察组细胞中DAPK启动子CpG岛甲基化状态为阴性;④对照组的细胞凋亡率为2.09％,显著低于观察组的凋亡率6.02％,差异有统计学意义(x2 =0.368,P=0.036);⑤对照组细胞的侵袭能力为6.12士0.32,明显优于观察组的2.34±0.12,差异有统计学意义(t=3.245,P=0.022).结论:5-Aza-CdR能显著增加5637细胞中DAPK的表达,而DAPK能明显促进BUCC细胞的凋亡,且显著抑制BUCC细胞的侵袭(迁移)能力,提示5-Aza-CdR可作为BUCC的基因靶向治疗药物.