原核表达番木瓜环斑病毒NIa-Pro及其双重酶活鉴定

• 作者: 周鹏 庹德财 沈文涛 言普 郑继平 韩杰 黎小瑛
• 来源期刊: 热带作物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: NIa-Pro 番木瓜环斑病毒 原核表达 蛋白酶 DNA酶
• 年，卷（期）: 2016,（4）
• 所属期刊栏目: 生物技术与组织培养
• 页码范围: 722-727
• 页数: 6页
• 分类号: Q939.46
• 字数: 4902字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-2561.2016.04.013

摘要

番木瓜环斑病毒(Papaya ringspot virus,PRSV)编码的核内涵体蛋白a蛋白酶(Nuclear inclusion body a proteinase,NIa-Pro)是一种多功能病毒非结构蛋白,在病毒侵染宿主及病毒与宿主互作中起着重要作用.本研究利用以麦芽糖结合蛋白(MBP)为融合表达框架的原核表达系统构建了表达NIa-Pro的重组载体pMAL-c5x-NP,并转化大肠杆菌,经IPTG诱导和Ni2+-NTA-琼脂糖亲和层析纯化获得了可溶的重组融合蛋白MBP-NIa(N端和C端分别融合MBP和His标签),然后利用蛋白酶Factor Xa切去重组融合蛋白中的MBP,再通过直链淀粉树脂亲和层析纯化获得了可溶的重组蛋白NIa-Pro.活性检测结果表明,重组蛋白PRSV-NIa-Pro具有非特异的双链DNA酶和特异的蛋白酶双重活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黎小瑛	中国热带农业科学院热带生物技术研究所	36	352	8.0	18.0
2	郑继平	海南大学农学院	28	92	7.0	8.0
3	周鹏	海南大学农学院	35	343	9.0	18.0
4	沈文涛	中国热带农业科学院热带生物技术研究所	66	524	11.0	20.0
5	言普	中国热带农业科学院热带生物技术研究所	33	132	5.0	9.0
6	庹德财	中国热带农业科学院热带生物技术研究所	13	24	3.0	4.0
7	韩杰	海南大学农学院	1	5	1.0	1.0