长期高氧暴露对新生小鼠肺微血管发育及Ephrin-B2表达的影响

• 作者: 封志纯 李秋平 马倩倩 马兴娜
• 来源期刊: 中华围产医学杂志
• 关键词: 支气管肺发育不良 微血管 膜附着型配体B2 疾病模型,动物
• 年，卷（期）: 2016,（7）
• 所属期刊栏目: 论 著
• 页码范围: 516-521
• 页数: 6页
• 字数: 4426字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1007-9408.2016.07.008

摘要

目的：观察长期高氧暴露对新生小鼠肺微血管发育及Ephrin-B2表达的影响。方法2日龄昆明小鼠48只，随机分为高氧组和空气组，每组24只。高氧组采用吸入70%浓度氧气制作新生小鼠支气管肺发育不良（bronchopulmonary dysplasia，BPD）模型。于3、7、14、21日龄每组各处死6只小鼠。取肺组织，HE染色观察肺组织病理变化，行辐射状肺泡计数，CD34免疫组织化学染色观察微血管情况，并计数微血管数量。采用肺组织免疫组织化学染色检测Ephrin-B2表达定位及其光密度，同时采用实时荧光定量-聚合酶链反应技术和Western印迹技术检测Ephrin-B2 mRNA和蛋白表达水平。采用两独立样本t检验进行统计学分析。结果（1）肺组织病理及辐射状肺泡计数和微血管密度：随日龄增加，高氧组小鼠肺组织渐呈典型的BPD样改变，主要表现为肺泡发育简化，肺微血管数量减少。高氧组14日龄时辐射状肺泡计数和微血管密度均显著低于空气组[（6.067±0.432）与（6.950±0.243）个，t=4.365，P＜0.05；4.133±0.476与4.867±0.472， t=2.680，P＜0.01]，21日龄时降低更加明显[（8.050±0.362）与（9.817±0.487）个，t=7.127，P＜0.05；4.333±0.532与6.017±0.937，t=3.828，P＜0.01]。（2）Ephrin-B2蛋白定位及表达强度：Ephrin-B2主要表达于肺泡上皮细胞，肺泡间隔亦有少许表达。高氧组7、14和21日龄Ephrin-B2表达强度（平均光密度）分别为0.146±0.013、0.140±0.007和0.138±0.008，均低于空气组（分别为0.153±0.009、0.161±0.006和0.166±0.009，t值分别为－2.049、－9.442和－10.087，P值均＜0.05）。（3）Ephrin-B2 mRNA和蛋白含量：高氧组Ephrin-B2 mRNA在14和21日龄时明显低于空气组（0.65±0.14与1.05±0.16，0.57±0.09与1.13±0.18，t值分别为4.609和6.816，P值均＜0.01）；高氧组Ephrin-B2蛋白含量（相对灰度值）在21日龄时低于空气组（0.13±0.03与0.29±0.08，t=4.587，P＜0.01）。结论高氧诱导BPD模型鼠存在肺泡简化和微血管受损，同时Ephrin-B2表达降低，Ephrin-B2受损可能在BPD的发病机制中扮演重要角色。