红花脂质转运蛋白基因的克隆及表达分析

• 作者: 吴贯达 官丽莉 崔琪 李校堃 李海燕 武云云 滕孝花 胡人阁 韩怡来 顾天瑶
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: 脂质转运蛋白 红花 荧光定量 PCR 生物信息学分析
• 年，卷（期）: 2016,（7）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 146-151
• 页数: 6页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2016.07.022

摘要

克隆红花脂质转运蛋白基因（Lipid transfer protein，LTP），并进行生物信息学及表达分析，旨为研究 LTP 在红花抵抗逆境胁迫中的作用提供依据。通过 RT-PCR 方法从红花种子中克隆 LTP 基因序列，通过生物信息学对该基因蛋白的特征进行分析，构建 LTP 与相关物种 LTP 的系统进化树，利用 Real-time PCR 方法分析在红花不同号组织中 LTP 基因的表达量。结果显示，LTP基因 ORF 全长294 bp，编码97个氨基酸，相对分子量为7.46 kD，等电点为8.91。红花 LTP 蛋白包含一个长为29个氨基酸残基的信号肽序列；该蛋白含有一个丝氨酸磷酸化位点；三级结构预测表明该蛋白是由3个α-螺旋和一个β-转角简单的缠绕在无规则卷曲上的简单结构。分子进化表明，红花 LTP 基因与十字花科的甘蓝型油菜进化关系最近。通过荧光定量 PCR 对红花 LTP 基因的组织表达特异性进行分析，结果表明 CtLTP 在不同组织的表达水平具有显著差异，在种子和花中呈现高表达，而在其他组织中低表达。