慢病毒介导的 RNA 干扰下调 p16的表达对 hUC－MSCs 衰老的影响

• 作者: 关方霞 孟楠 朱相展 杨波 王欣欣 石振庆 邢衢 韩康 韩莉 马珊珊 黄团结
• 来源期刊: 郑州大学学报（医学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: siRNA p16 慢病毒 人脐带间充质干细胞 衰老
• 年，卷（期）: 2016,（4）
• 所属期刊栏目: ? 论著?
• 页码范围: 446-450
• 页数: 5页
• 分类号: Q291
• 字数: 3093字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13705/j.issn.1671-6825.2016.04.003

摘要

目的：利用慢病毒（LV）介导的 RNA 干扰下调老龄人脐带间充质干细胞（hUC－MSCs）中 p16基因的表达，研究 p16表达下调与 hUC－MSCs 衰老的关系。方法：实验分为第3代（P3）hUC－MSCs 组（P3组）、P15 hUC－MSCs组（P15组）、LV－sip16感染 P15 hUC－MSCs 组（LV－sip16组）和 LV－NC 感染 P15 hUC－MSCs 组（空病毒组）。采用CCK－8法检测细胞增殖，β－半乳糖苷酶染色计算衰老细胞率，流式细胞术检测细胞周期及凋亡，qRT－PCR 检测衰老相关基因 p16、p21、p53、pCNA、sirt1、sirt2、CyclinD1、CDK4 mRNA 的表达。结果：LV－sip16感染能促进 P15 hUC－MSCs 增殖，降低衰老细胞率，促使细胞周期进入 S 期，抑制 hUC－MSCs 的早期凋亡（P 均＜0．05）；同时，LV－sip16组细胞中 p16、p21、p53 mRNA 表达量较 P15组降低，而 pCNA、sirt1、sirt2、CyclinD1、CDK4 mRNA 表达量升高（P 均＜0．05）。结论：下调 P15 hUC－MSCs 中 p16基因的表达能够延缓和改善 hUC－MSCs 的衰老。