可视化紫杉醇肿瘤耐药评价细胞系的建立及应用

• 作者: 张书玉 徐可儿 马香华
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 生物学
• 关键词: 肿瘤 活细胞观察 化疗耐药 有丝分裂
• 年，卷（期）: 2016,（5）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 653-658
• 页数: 6页
• 分类号: Q253
• 字数: 3649字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2016.05.011

摘要

目的:构建稳定表达微管蛋白(GFP-α-tubulin)及组蛋白(RFP-H2B)的HeLa细胞系,用来观察肿瘤细胞有丝分裂中的染色体及微管运动,以及在紫杉醇作用下肿瘤细胞产生耐药的实时过程.方法:利用慢病毒感染的方法构建稳定标记GFP-α-tubulin及RFP-H2B的HeLa细胞系;以此为基础,利用Time-lapse显微镜实时观察该细胞有丝分裂过程中染色体及微管的运动;而后在G FP-α-tubulin/RFP-H2B/HeLa细胞系加入微管相关化疗药后,利用Time-lapse显微镜及Image J软件分析微管的光强变化.结果:构建的细胞具有正常的有丝分裂进程,定量GFP-α-tubulin的光强可用来反映微管的稳定性;在该细胞中过表达癌基因Aurora A并加入紫杉醇处理,可通过标记的微管及组蛋白的动态变化观察到细胞逃逸紫杉醇导致的细胞凋亡,最终产生多核的非整倍体耐药表型.结论:GFP-α-tubulin/RFP-H2B/HeLa细胞系不但可作为研究染色体排列及微管形态的细胞模型,对于评价紫杉醇导致的肿瘤细胞耐药也有重要的应用价值.