补肾方对激素性股骨头坏死大鼠股骨头血管形态和血液状态的影响

• 作者: 刘春芳 姜宜妮 林娜 汪倩倩 王慧 陈卫衡
• 来源期刊: 中医正骨
• 关键词: 股骨头坏死 大鼠,Wistar 补肾方 血管形态 血液状态 动物实验
• 年，卷（期）: 2016,（6）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1-11
• 页数: 11页
• 字数: 6229字
• 语种: 中文

摘要

目的：探讨补肾方对激素性股骨头坏死（osteonecroois of the femoral head，ONFH）大鼠股骨头血管形态和血液状态的影响。方法：将120只雄性 Wistar 大鼠随机分为空白组、模型组、健骨生丸组、补肾方高剂量组、补肾方中剂量组和补肾方低剂量组，每组20只。除空白组外，其余5组大鼠臀肌注射甲泼尼龙琥珀酸钠，连续注射3 d，建立激素性 ONFH 模型。甲泼尼龙琥珀酸钠注射完后，空白组、模型组自由饮食；健骨生丸组按1．68 g·kg －1以健骨生丸灌胃，每天1次，连续6周；补肾方高、中、低剂量组分别按21．2 g·kg －1、10．6 g·kg －1、5．3 g·kg －1以补肾方灌胃，每天1次，连续6周。药物干预结束后，先从各组随机选取10只大鼠，麻醉后腹主动脉取血，动物死亡后，取双侧股骨头制成石蜡切片。将所取腹主动脉血分成2份，一份取血清测定甘油三酯（tri-glyceride，TG）、总胆固醇（total cholesterol，TC）、高密度脂蛋白（high density lipoprotein，HDL）、低密度脂蛋白（low density lipoprotein， LDL）、载脂蛋白 A1（apolipoprotein A1，ApoA1）及 ApoB；另一份取全血以旋转法测定全血黏度低切值、中切值和高切值，取血浆检测血浆黏度。制成的股骨头组织切片分成2份，一份进行 HE 染色，光学显微镜下观察骨组织形态；另一份进行免疫组织化学染色，测定血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）和 FLK1蛋白表达情况。各组剩余的10只大鼠应用血管造影结合 Micro －CT 扫描技术测定股骨头中血管体积、血管表面积、血管体积分数及血管厚度。结果：①血脂检测结果。6组大鼠血清 TG、TC、LDL、HDL、ApoA1和 ApoB 含量比较，组间差异均有统计学意义（F ＝4．538，P ＝0．004；F ＝3．322，P ＝0．018；F ＝2．681， P ＝0．043；F ＝2．621，P ＝0．047；F ＝2．400，P ＝0．035；F ＝3．741，P ＝0．010）。空白组、健骨生丸组、补肾方中剂量组和补肾方高剂量组 TG、TC、LDL、ApoB 含量均低于模型组（P ＝0．000，P ＝0．021，P ＝0．009，P ＝0．032；P ＝0．008，P ＝0．016，P ＝0．031，P ＝0．030；P ＝0．009，P ＝0．017，P ＝0．036，P ＝0．031；P ＝0．005，P ＝0．013，P ＝0．031，P ＝0．025），HDL、ApoA1含量均高于模型组（P ＝0．019，P ＝0．034；P ＝0．041，P ＝0．034；P ＝0．040，P ＝0．031；P ＝0．035，P ＝0．029）；补肾方低剂量组 TC 含量低于模型组（P ＝0．023），TG、LDL、HDL、ApoA1、ApoB 含量与模型组比较，组间差异均无统计学意义（P ＝0．297，P ＝0．315，P ＝0．189，P ＝0．084，P ＝0．333）；补肾方低剂量组血清 TG、TC、LDL、ApoB 含量均高于健骨生丸组（P ＝0．037，P ＝0．018，P ＝0．041，P ＝0．047）， HDL、ApoA1含量均低于健骨生丸组（P ＝0．046，P ＝0．043）；补肾方中剂量组和健骨生丸组血清 TG、TC、LDL、HDL、ApoA1、ApoB含量比较，组间差异均无统计学意义（P ＝0．080，P ＝0．440，P ＝0．375，P ＝0．204，P ＝0．130，P ＝0．389）；补肾方高剂量组血清 TG、TC、LDL、ApoB 含量均低于健骨生丸组（P ＝0．019，P ＝0．022，P ＝0．024，P ＝0．039），HDL 含量高于健骨生丸组（P ＝0．043），2组ApoA1含量比较，差异无统计学意义（P ＝0．094）；补肾方中剂量组和高剂量组血清 TG、TC、LDL、ApoB 含量均低于低剂量组（P ＝0．033，P ＝0．021，P ＝0．042，P ＝0．042；P ＝0．021，P ＝0．019，P ＝0．018，P ＝0．034），HDL 含量均高于低剂量组（P ＝0．048；P ＝0．042），2组 ApoA1含量与补肾方低剂量组比较，组间差异均无统计学意义（P ＝0．053；P ＝0．057）；补肾方高剂量组血清 TG、TC、LDL、ApoB 含量均低于中剂量组（P ＝0．029，P ＝0．020，P ＝0．020，P ＝0．035），HDL 含量高于中剂量组（P ＝0．045），2组 ApoA1含量比较，组间差异无统计学意义（P ＝0．239）。②血液流变学指标检测结果。6组大鼠全血黏度低切值、全血黏度中切值及血浆黏度比较，组间差异均有统计学意义（F ＝3．291，P ＝0．019；F ＝3．256，P ＝0．020；F ＝3．779，P ＝0．010）；6组全血黏度高切值比较，差异无统计学意义（F ＝2．460，P ＝0．059）。空白组、健骨生丸组、补肾方中剂量组和补肾方高剂量组全血黏度低切值、全血黏度中切值及血浆黏度均低于模型组（P ＝0．017，P ＝0．033，P ＝0．011；P ＝0．026，P ＝0．043，P ＝0．040；P ＝0．028，P ＝0．012，P ＝0．028；P ＝0．023，P ＝0．010，P ＝0．022）；补肾方低剂量组全血黏度低切值、全血黏度中切值及血浆黏度与模型组比较，差异均无统计学意义（P ＝0．085，P ＝0．069，P ＝0．094）；补肾方低剂量组血浆黏度高于健骨生丸组（P ＝0．049），2组全血黏度低切值、全血黏度中切值比较，组间差异均无统计学意义（P ＝0．054，P ＝0．057）；补肾方中剂量组和健骨生丸组全血黏度低切值、全血黏度中切值及血浆黏度比较，组间差异均无统计学意义（P ＝0．091，P ＝0．083，P ＝0．055）；补肾方高剂量组全血黏度中切值和血浆黏度均低于健骨生丸组（P ＝0．045，P ＝0．014），2组全血黏度低切值比较，差异无统计学意义（P ＝0．214）；补肾方中剂量组全血黏度低切值、血浆黏度均低于低剂量组（P ＝0．048，P ＝0．032），2组全血黏度中切值比较，组间差异均无统计学意义（P ＝0．051）；补肾方高剂量组全血黏度低切值、全血黏度中切值及血浆黏度均低于低剂量组（P ＝0．030，P ＝0．048，P ＝0．013）；补肾方高剂量组全血黏度低切值、血浆黏度均低于中剂量组（P ＝0．049，P ＝0．027），2组全血黏度中切值比较，组间差异无统计学意义（P ＝0．052）。③VEGF 蛋白和 FLK1蛋白测定结果。6组大鼠股骨头内 VEGF 蛋白和 FLK1蛋白表达量比较，组间差异均有统计学意义（F ＝9．519，P ＝0．000；F ＝5．317，P ＝0．009）。空白组、健骨生丸组、补肾方中剂量组和补肾方高剂量组 VEGF 蛋白和 FLK1蛋白表达量均高于模型组（P ＝0．000，P ＝0．000；P ＝0．005，P ＝0．009；P ＝0．004，P ＝0．008；P ＝0．000，P ＝0．000）；补肾方低剂量组 VEGF蛋白表达量与模型组比较，差异无统计学意义（P ＝0．051），FLK1蛋白表达量高于模型组（P ＝0．047）；补肾方低剂量组 VEGF 蛋白和 FLK1蛋白表达量均低于健骨生丸组（P ＝0．041，P ＝0．036）；补肾方中剂量组 VEGF 蛋白和 FLK1蛋白表达量与健骨生丸组比较，组间差异均无统计学意义（P ＝0．175；P ＝0．221）；补肾方高剂量组 VEGF 蛋白和 FLK1蛋白表达量均高于健骨生丸组（P ＝0．045；P ＝0．047）；补肾方中剂量组和高剂量组 VEGF 蛋白、FLK1蛋白表达量均高于低剂量组（P ＝0．047，P ＝0．044；P ＝0．016， P ＝0．011）；补肾方高剂量组 FLK1蛋白表达量高于中剂量组（P ＝0．042），2组 VEGF 蛋白表达量比较，组间差异无统计学意义（P ＝0．051）。④股骨头内血管 Micro －CT 检查结果。6组大鼠股骨头血管体积、血管表面积、血管体积分数、血管厚度比较，组间差异均有统计学意义（F ＝36．442，P ＝0．000；F ＝7．080，P ＝0．000；F ＝27．869，P ＝0．000；F ＝8．371，P ＝0．000）。空白组、健骨生丸组、补肾方中剂量组、补肾方高剂量组血管体积、血管表面积、血管体积分数、血管厚度均大于模型组（P ＝0．000，P ＝0．000，P ＝0．000，P ＝0．000；P ＝0．009，P ＝0．003，P ＝0．002，P ＝0．001；P ＝0．000，P ＝0．001，P ＝0．001，P ＝0．000；P ＝0．007，P ＝0．015，P ＝0．011，P ＝0．005）；补肾方低剂量组与模型组血管体积、血管表面积、血管体积分数、血管厚度比较，组间差异均无统计学意义（P ＝0．051，P ＝0．052，P ＝0．082，P ＝0．064）；补肾方低剂量组、补肾方中剂量组与健骨生丸组血管体积、血管表面积、血管体积分数、血管厚度比较，组间差异均无统计学意义（P ＝0．057，P ＝0．063，P ＝0．051，P ＝0．052；P ＝1．000，P ＝0．222，P ＝1．000，P ＝0．813）；补肾方高剂量组血管体积、血管表面积、血管体积分数、血管厚度均大于健骨生丸组（P ＝0．000，P ＝0．017，P ＝0．000，P ＝0．010）；补肾方中剂量组和高剂量组血管体积、血管表面积、血管体积分数、血管厚度均大于低剂量组（P ＝0．000，P ＝0．023，P ＝0．001，P ＝0．021；P ＝0．000，P ＝0．015，P ＝0．000，P ＝0．007）；补肾方高剂量组血管体积、血管表面积、血管体积分数、血管厚度均大于中剂量组（P ＝0．000，P ＝0．019，P ＝0．000，P ＝0．009）。结论：补肾方能促进激素性 ONFH 大鼠股骨血管修复，改善股骨头血液微循环状态，其作用可能与补肾方增加股骨头内 VEGF 和 FLK1蛋白表达有关，且中剂量补肾方的疗效与健骨生丸相当，高剂量补肾方的疗效优于健骨生丸。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	林娜	中国中医科学院中药研究所	110	1558	25.0	34.0
2	陈卫衡		123	1759	25.0	36.0
3	刘春芳	中国中医科学院中药研究所	36	479	15.0	21.0
4	姜宜妮	中国中医科学院中药研究所	2	39	2.0	2.0
5	王慧	中国中医科学院中药研究所	9	65	6.0	8.0
6	汪倩倩		1	7	1.0	1.0