UT-7/EPO细胞培养条件的优化及复壮

• 作者: 宋婉莹 杨姝 章金刚 贾俊婷 赵福广 马玉媛
• 来源期刊: 中国生物制品学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: UT-7/EPO细胞 培养条件 优化 复壮
• 年，卷（期）: 2016,（2）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 134-139
• 分类号: Q2-33
• 语种: 中文

摘要

目的 使复苏后处于衰亡状态的UT-7/EPO细胞恢复正常生长状态,并优化其生长密度.方法 通过更换不同培养基(改良的RPMI 1640、DMEM和IMDM培养基)、调整血清浓度(10％、15％和20％)、改变生长因子加量(1、3、5 U/ml)及将小鼠腹腔细胞作为饲养细胞与UT-7/EPO细胞共培养,对UT-7/EPO细胞进行复壮.对恢复正常生长状态后的UT-7/EPO细胞,利用CCK-8法绘制细胞生长曲线,并根据生长曲线通过梯度密度培养确定UT-7/EPO细胞在不同培养器皿(48、24、12、6L板及25 cm2细胞培养瓶)中的最适培养密度.将传代后第2天处于对数生长期的UT-7/EPO细胞冻存及复苏传代3次后,连续培养9 d,检测复壮后UT-7/EPO细胞的初步稳定性.将复壮后UT-7/EPO细胞分别用人源STR试剂及小鼠细胞STR位点进行鉴定.结果 更换培养基、改变血清和生长因子加量均不能使衰亡的UT-7/EPO细胞的生长状态有明显改善;饲养细胞与UT-7/EPO细胞共培养可使UT-7/EPO细胞恢复正常生长状态;获得了UT-7/EPO细胞在不同培养器皿中的最适培养密度.复苏后的细胞生长状况良好,与未冻存前的生长状态及活力相当.人源STR位点检测结果显示,复壮后的UT-7/EPO细胞STR图谱均为单个或2等位基因峰,无其他人源细胞的污染;小鼠STR位点检测结果显示,复壮后的细胞未发现饲养细胞的污染.结论 饲养细胞能够有效地使UT-7/EPO细胞复壮;最适的细胞生长密度能有效地使细胞维持在稳定、良好的生长状态.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	章金刚	军事医学科学院野战输血研究所	124	845	15.0	21.0
2	赵福广	吉林农业大学生命科学学院	31	51	4.0	5.0
3	马玉媛	军事医学科学院野战输血研究所	27	129	7.0	9.0
4	贾俊婷	军事医学科学院野战输血研究所	9	24	3.0	4.0
5	宋婉莹	吉林农业大学生命科学学院	2	0	0.0	0.0
7	杨姝	军事医学科学院野战输血研究所	6	44	4.0	6.0