微小RNA-218靶定SOX5对胶质瘤细胞生长和侵袭的影响

• 作者: 任炳成 南阳 王乐 甄英伟 郭红宝 钟跃
• 来源期刊: 中华神经外科杂志
• 关键词: 神经胶质瘤 微RNAs SOX5基因 U87细胞
• 年，卷（期）: 2016,（6）
• 所属期刊栏目: 基础论著
• 页码范围: 625-630
• 页数: 6页
• 字数: 5197字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1001-2346.2016.06.022

摘要

目的 观察微小RNA-218(miR-218)靶定SOX5对胶质瘤细胞生长和侵袭的影响.方法 培养U87胶质瘤细胞株,将其分为对照组、无义序列组和miR-218转染组.取40例胶质瘤组织标本,35例正常脑组织.利用生物信息学方法、荧光素酶报告系统验证SOX5是miR-218的直接作用靶点.通过RT-PCR和Western blot方法检测U87细胞、胶质瘤组织及其正常脑组织中miR-218对SOX5 mRNA和蛋白表达的影响.在U87细胞中过表达miR-218后,利用MTT实验、Tanswell实验检测U87细胞表型的变化.利用RNA干扰技术沉默SOX5,利用MTT实验、Tanswell实验检测U87细胞表型的变化.结果 与对照组、无义序列组比较,miRNA-218转染组的miRNA-218相对表达量升高42.2倍;MTT法结果显示,过表达miRNA-218后,胶质瘤细胞生长明显受到抑制,第5天细胞增殖率仅为49.2％;Transwell法结果显示,miRNA-218组穿过Transwell小室的细胞数为(13.0±2.1)个,低于对照组和无义序列组的(35.0±2.3)个和(32.0±3.1)个(均P ＜0.05).生物学信息预测SOX5是miR-218的靶基因之一,在SOX5 3'端非编码区含有miR-218的结合位点;双荧光素酶实验提示,SOX5为miR-218的直接作用靶点.过表达miR-218后,RT-PCR和Western blot检测显示,miR-218转染组SOX5 mRNA和蛋白的表达明显低于对照组和无义序列组,差异有统计学意义(P＜0.01).与正常脑组织比较,胶质瘤组织中miRA-218 mRNA的相对表达量降低,而SOX5 mRNA相对表达量升高(P＜0 01).沉默SOX5后,MTT法结果显示,细胞培养第5天,SOX5沉默[小干扰RNA(siRNA)-SOX5]组细胞增值率仅为siControl(无序列)组的51.0％;Transwell法分析显示,SOX5沉默组穿过Transwell小室的细胞数为(12.0±1.3)个,低于siControl组的(23.0±2.0)个(P＜0.05).结论 SOX5是miR-218的靶基因,并受其负向调控.miR-218可能通过靶定SOX5在胶质瘤的发病机制中起重要作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	南阳	天津市神经病学研究所神经肿瘤实验室天津医科大学总医院神经外科	3	18	2.0	3.0
2	王乐	天津市神经病学研究所神经肿瘤实验室天津医科大学总医院神经外科	1	1	1.0	1.0
3	任炳成	天津市神经病学研究所神经肿瘤实验室天津医科大学总医院神经外科	1	1	1.0	1.0
4	甄英伟	天津市神经病学研究所神经肿瘤实验室天津医科大学总医院神经外科	1	1	1.0	1.0
5	郭红宝	天津市神经病学研究所神经肿瘤实验室天津医科大学总医院神经外科	1	1	1.0	1.0